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【大咖解读】XPO1抑制剂助力CD19 CAR-T细胞治疗在恶性血液系统肿瘤中的疗效升级

2021年07月29日

整理：肿瘤资讯
来源：肿瘤资讯

CD19 CAR-T细胞治疗在淋巴系统恶性肿瘤患者中已经取得显著疗效，包括急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性淋巴细胞白血病（CLL）及其他非霍奇金淋巴瘤（NHL）等。但仍有部分患者出现原发耐药或复发，从而限制疗效。联合用药可能会降低肿瘤细胞免疫逃逸能力。选择性核输出蛋白1（XPO1）抑制剂（SINEs）已在多种血液肿瘤中显示出较好的疗效。近日，发表Oncology Reports上的一篇文章探讨了SINE化合物塞利尼索（Selinexor）和eltanexor对肿瘤细胞以及CAR-T细胞治疗的影响，并评估eltanexor和CD19 CAR-T细胞治疗的潜在组合效应。【肿瘤资讯】特邀华中科技大学同济医学院附属同济医院周剑峰教授、江苏省人民医院李建勇教授对本文内容进行了点评，详情如下。

周剑峰教授

主任医师，博士生导师

华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科主任
教育部重点实验室“同济医院肿瘤生物医学中心”副主任
湖北省血液免疫细胞治疗临床研究中心主任
中华医学会血液分会常务委员、实验诊断学组副组长
中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会候任主任委员、青年委员会主任委员
中国基因治疗协会委员
中国实验血液学会委员
国家杰出青年基金获得者
国家自然科学基金终审评委

李建勇教授

博士生导师、博士后合作导师

南京医科大学第一附属医院血液科主任

江苏省人民医院浦口慢淋中心
中华医学会血液学分会常委、淋巴细胞疾病学组组长
中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会第四届主任委员，第五届名誉主任委员、淋巴瘤学组组长
中国慢性淋巴细胞白血病工作组组长
CSCO中国淋巴瘤联盟副主席
中华医学会肿瘤学分会淋巴瘤学组副组长
江苏省老年医学会血液学分会主任委员
江苏省医师协会血液科医师分会候任会长
江苏省医学会血液学分会前任主任委员
南京医学会血液学分会主任委员
中国医师协会整合血液病学专业委员会副主任委员
中国免疫学会血液免疫分会常委

SINEs显示出良好的抗CD19阳性肿瘤细胞活性，敏感性与XPO1表达水平相关

塞利尼索（Selinexor）和eltanexor可有效抑制细胞株的细胞活力（下图），IC50依次为Reh（Selinexor：0.16±0.01μM，eltanexor：0.05±0.01μM）、Nalm-6（Selinexor：0.30±0.02μM，eltanexor：0.14±0.03μM）、Daudi（Selinexor：0.60±0.09μM，eltanexor：0.30±0.03μM）、Raji（Selinexor：1.33+1.16μM，eltanexor：0.23±0.03μM），其敏感性与SINEs靶细胞CRMI/XPO1的蛋白水平相关。ALL细胞株Reh（2.10±0.01）、Nalm‑6（1.86±0.01）的XPO1蛋白水平均高于NHL细胞株Daudi（0.44±0.01）、Raji（0.81±0.01）（P<0.05）。

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当使用eltanexor预处理肿瘤细胞时，CAR-T细胞的细胞毒性显著增强

在CAR-T细胞治疗前使用eltanexor预处理肿瘤细胞（Nalm‑6：0.05μM；Reh：0.1μM；Daudi：0.1μM；Raji：0.5 μM）并洗去，再将经过预处理的肿瘤细胞与CAR-T细胞共培养24小时。与DMSO对照组相比，经0.05μM eltanexor预处理显著提高了CAR-T细胞对Nalm-6和Reh的细胞毒性。经0.1μM eltanexor预处理的Daudi细胞中也观察到CAR-T细胞的疗效增加。然而，对SINEs敏感性最低的Raji细胞，在经过0.1或0.5μM eltanexor预处理后，并未出现CAR-T细胞毒性增强。此外，用高浓度的eltanexor预处理肿瘤细胞可以逆转CAR-T细胞的细胞毒性。

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当使用eltanexor预处理肿瘤细胞时，CAR-T细胞的细胞因子释放增加

如图所示，当分别使用0.05μM、0.1μMeltanexor预处理Nalm‑6、Daudi细胞后，CD4⁺和CD8⁺ CAR-T细胞均观察到单一的细胞因子释放水平增加。TNF‑α⁺IFN‑γ⁺虽也有增加趋势，但无统计学差异。Reh、Raji细胞中未观察到细胞因子显著增加。

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当使用eltanexor预处理肿瘤细胞时，CAR-T细胞的耗竭标志物表达降低

与DMSO对照组相比，经0.05μM eltanexor预处理后Nalm-6、Reh细胞的LAG-3、PD-1及Tim-3表达降低[Nalm‑6：LAG‑3：35.7±1.4 vs. 40.3±1.0%（P<0.0001），PD‑1：24.1±2.5 vs. 27.9±0.5%（P=0.0004），Tim‑3：50.1±1.0 vs. 54.3±0.8%（P=0.0225）；Reh：LAG‑3: 31.0±0.6 vs. 32.3±0.8%（P=0.0335），PD‑1：15.4±1.5% vs. 20.0±0.5%（P=0.0317），Tim‑3：40.7±1.3 vs. 45.7±1.2%（P=0.0100）]。经0.1μM eltanexor预处理后的Daudi细胞也出现了上述表达降低（LAG-3：47.5±2.0 vs. 61.2+1.2%，P=0.0030；PD-1：57.7±2.3 vs. 65.9+2.0%，P=0.1585；Tim-3：41.5±1.1 vs. 61.6±0.8%，P=0.0060）。Raji细胞无耗竭标记物减低。

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专家点评

周剑峰教授：全球CAR-T治疗临床试验登记项目数量目前已超过600项，其中中国以约50%的占比位居全球首位。CD19是国内CAR-T治疗在血液瘤领域最常见的研究对象。2020年，The Lancet Haematology发表的一篇Mata分析结果显示CD19 CAR-T疗法总体的完全缓解率为80%。CD19 CAR-T疗法是革命性的，因为它已经产生了非常有效和持久的临床反应，但是仍有多种未被满足的治疗需求，如危及生命的CAR-T细胞相关毒性、B细胞恶性肿瘤中的抑制和抵抗性、抗原逃逸、有限的持久性、较差的迁移和肿瘤浸润以及免疫抑制性微环境等等。

基于上述现状，研究者们已提出许多方案，如将CAR-T细胞疗法与其它抗肿瘤策略结合、采用新技术优化CAR-T产品等等。在这篇文献中，研究者首次提出在CD19 CAR-T细胞治疗前使用XPO1抑制剂eltanexor预处理，可增强疗效，可作为我们未来探索的新方向，结果令人期待。

李建勇教授：核输出蛋白1（XPO1）负责调节超过240种蛋白质等从胞核向胞浆的输出，其中包括了多种抑癌基因蛋白（TSPs, e.g., p53, IkB和FOXO）、与elF4E结合的致癌蛋白mRNA（如c-Myc,Bcl-xL, MDM2,cyclins），生长调节蛋白（GRPs）等。在某些肿瘤细胞中，XPO1过量表达，导致多种蛋白发生亚细胞定位及功能紊乱，从而抑制肿瘤细胞凋亡进程，促进肿瘤发生发展。

塞利尼索（Selinexor）是目前首款且唯一一款被美国FDA批准的口服SINE化合物，也是首款同时可用于治疗多发性骨髓瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤的药物。Eltanexor是第二代XPO1抑制剂，相较于一代药物，其具有较低的血脑屏障渗透及较广的治疗窗口，耐受性更佳，从而有利于实现更高频次、高浓度和长时间的药物暴露。目前，国内有多项XPO1抑制剂的临床研究正在开展。由于XPO1抑制剂安全性良好，可口服，所以非常适合和其它药物联合使用，相关研究表明XPO1抑制剂和一些常见的抗肿瘤药物，如铂类、阿霉素、VP16、BTK抑制剂、PD1抑制剂等，都有明显的协同作用。XPO1抑制剂与CAR-T的联合使用也是一个全新的尝试，治疗前使用可降低肿瘤负荷、增强CAR-T疗效，但是具体如何搭档使用是患者获益最大化，仍需更多的临床研究探索。期待XPO1抑制剂的上市，希望能为更多患者带来生存获益。

责任编辑：Amiee
排版编辑：Chris