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TP53突变与EGFR扩增在早期EGFR突变NSCLC风险分层中的作用——免疫组化作为替代标志物

12月30日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

早期EGFR突变NSCLC患者术后仍可能面临较高复发风险，共存基因变异的预后价值尚未完全明确。本文基于424例患者的回顾性数据，探究TP53突变、EGFR扩增对早期患者生存的影响，并验证免疫组化（IHC）作为基因检测替代手段的可行性，为临床风险分层和辅助治疗决策提供实用参考。

背景

NSCLC是全球癌症相关死亡的主要原因，早期患者虽以手术切除为标准治疗，但5年内复发率仍达30%-55%。EGFR突变在肺腺癌中发生率约20%，亚洲患者高达50%，此类肿瘤对EGFR-TKI敏感，但治疗结局存在异质性。二代测序（NGS）的普及让人们认识到EGFR突变之外的共存基因变异的重要性，其中TP53突变、EGFR扩增在晚期NSCLC中已被证实与TKI疗效降低、生存期缩短相关，但在早期患者中的预后意义研究较少且结论不一致。辅助EGFR-TKI已证实能改善切除后EGFR突变IB-IIIA期NSCLC患者的总生存期，因此识别早期高复发风险患者至关重要，本研究聚焦早期EGFR突变NSCLC中TP53突变和EGFR扩增的临床意义、预后价值及风险关联。

研究方法

本回顾性研究纳入2017年4月至2022年3月首尔圣玛丽医院424例EGFR突变NSCLC患者，排除接受新辅助治疗和复发患者。提取患者临床资料和随访信息，由两名肺病理学家独立审核苏木精-伊红染色切片，确定组织学诊断、TNM分期（AJCC第8版）及淋巴血管侵犯、气道播散（STAS）、组织学分级等病理风险因素，分歧通过共识解决。

从福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）肿瘤样本中提取DNA和RNA，经质量评估后，使用Oncomine Comprehensive Assay Plus DNA Panel进行靶向NGS测序，检测501个癌症相关基因的体细胞突变、拷贝数变异和基因融合，测序数据经Ion Reporter软件分析并注释。

FFPE组织切片经IHC分析，P53采用DO-7单克隆抗体，EGFR采用EGFR.113小鼠单克隆抗体。P53 IHC根据阳性细胞百分比分类（排除<1%的无表达型），EGFR IHC采用组织化学评分（H-score），计算方式为染色强度（0-3分）与对应阳性细胞百分比的乘积之和（0-300分）。手术标本选取代表性切片进行分析，活检标本则考虑肿瘤异质性，分析所有可用切片。

采用R软件进行统计分析，Kaplan-Meier法和Cox比例风险模型评估总生存期（OS）和无病生存期（DFS），log-rank检验比较生存差异，计算风险比（HR）及95%置信区间（CI）；卡方检验或Fisher精确检验分析基因变异与临床病理因素的关联；受试者工作特征（ROC）曲线确定IHC预测基因变异的最佳临界值，计算曲线下面积（AUC）量化预测准确性，p<0.05为差异有统计学意义。事后功效分析证实样本量足够（观察到108例复发或死亡事件）。

研究结果

患者临床病理特征

424例患者中，女性占65.3%（277例），不吸烟者占71.5%（303例）；组织学类型以腺癌为主（97.9%，415例）；手术标本占77.6%（329例），活检标本占22.4%（95例）；分期分布为I期61.8%（262例）、II期4.5%（19例）、III期9.7%（41例）、IV期24.1%（102例）；EGFR突变类型以L858R（46.5%，197例）和19号外显子缺失（40.8%，173例）为主。

共存基因变异的分布

TP53突变和EGFR扩增的发生率随分期升高而增加，I期发生率分别为21.37%和5.34%，II-IV期显著更高（p<0.001和p=0.005）；PIK3CA突变在IV期发生率更高（p=0.015），AR、MDM2等扩增无显著分期差异（p>0.05）。共存基因变异在不同EGFR突变亚型间无显著差异（p>0.05）；TP53突变患者的肿瘤突变负荷（TMB）有高于野生型的趋势（4.93±2.32 vs. 4.28±2.10，p=0.066）。

共存基因变异的预后意义

Cox分析显示，TP53突变与全分期患者更差的OS（HR=2.33，p<0.001）和DFS（HR=2.09，p<0.001）相关，但分期特异性分析未显示显著预后影响。EGFR扩增与全队列OS无显著关联，但与I期患者更短的DFS相关（HR=4.94，p=0.013）。Kaplan-Meier分析显示，I期患者中，TP53 4号外显子突变与更差的OS（HR=10.08，p=0.008）和DFS（HR=9.68，p<0.001）相关；移码/无义突变也与更差的OS（HR=6.93，p=0.022）和DFS（HR=7.92，p<0.001）相关（图1）。

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图1 、按照不同共存基因变异状态对比患者OS和DFS生存曲线

基因变异与临床病理因素的关联

TP53突变与更晚的T分期（p=0.012）、N分期（p=0.002）、淋巴血管侵犯（p<0.001）、STAS（p<0.001）、胸膜侵犯（p=0.005）和高组织学分级（p<0.001）相关；EGFR扩增与淋巴血管侵犯（p<0.001）、STAS（p=0.012）和高组织学分级（p<0.001）显著相关；吸烟状态与两者均无关联（p>0.05）（表1）。

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表1 TP53突变和EGFR扩增与不同临床病理危险因素的相关性

基因变异与免疫组化的相关性

IHC模式随TP53突变类型而异，移码/无义突变以无表达型染色为主，错义突变以过表达（90%-100%）为主，野生型TP53染色强度多在1%-10%。EGFR扩增与H-score相关，无扩增病例H-score多为0-100，扩增病例多为200-300。ROC曲线分析确定，TP53 IHC临界值15%（AUC=0.981）和EGFR IHC H-score≥180（AUC=0.935）对预测对应基因变异具有高准确性（图2）。

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图2 不同基因变异状态的免疫组化结果分布（A-B），利用ROC曲线分析免疫组化结果对对应基因变异的预测效能

结论

早期EGFR突变NSCLC中，特定类型TP53突变（4外显子突变、移码/无义突变）和EGFR扩增是重要预后标志物，与侵袭性病理特征和更高复发风险相关。免疫组化可作为基因检测的实用替代手段，其设定的临界值能准确预测TP53突变和EGFR扩增，助力临床风险分层及高风险患者的辅助治疗决策。

本研究为单中心回顾性分析，可能存在选择偏倚，I期患者占比高可能影响生存结局分析；缺乏外部验证队列，免疫组化临界值的可重复性需进一步验证；免疫组化解读可能存在观察者间变异，虽通过ROC分析确定临界值，但仍需外部验证确认临床适用性。未来需开展多中心前瞻性研究，进一步验证这些发现的可靠性和广泛临床意义。

参考文献

Kim M, Park GS, Lee KY, Moon SW, Sung YE. Role of TP53 Mutations and EGFR Amplification in Risk Stratification of Early-Stage EGFR-Mutated Non-Small Cell Lung Cancer With Immunohistochemistry as a Surrogate Marker. Thorac Cancer. 2025;16(7):e70058. doi:10.1111/1759-7714.70058。

审批编号：CN-176089 有效期：2026-3-29

声明：本材料由阿斯利康提供，仅供医疗卫生专业人士进行医学科学交流，不用于推广目的

责任编辑：肿瘤资讯-Yuno
排版编辑：肿瘤资讯-momo