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2025 WCLC | 奥希替尼诱导的肺腺癌耐药持久性细胞功能特征研究

08月14日
编译:肿瘤资讯
来源:肿瘤资讯
Session Type

Oral

Session Title

OA14. Cancer Evolution and Drug Resistance

摘要号

OA14.03

英文标题

Functional Characterization of Osimertinib-Induced Drug Tolerant Persisters in Lung Adenocarcinoma

中文标题

奥希替尼诱导的肺腺癌耐药持久性细胞功能特征研究

讲者

Kristyna Gorospe, BSc, MSc

讲者机构

University of Toronto

背景

表皮生长因子受体(EGFR)靶向治疗的耐药性限制了携带活化EGFR突变(EGFRmut)肺腺癌(LUAD)患者的生存期。耐药性可能源于耐药持久性细胞(DTPs)——一类稀有的、生长缓慢的细胞亚群,能够在酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗中存活,导致微小残留病灶并最终引发肿瘤复发。阐明EGFRmut LUAD中DTPs的生存机制可能揭示可靶向治疗的脆弱性,从而提高TKI疗效,但这些机制尚未得到充分研究。我们实验室此前采用EGFRmut LUAD患者来源异种移植(PDX)模型,比较了一代TKI厄洛替尼诱导的DTP肿瘤与初治对照组的基因表达变化(Moghal等,J Thoracic Oncol, 2023; 18: 499-515),发现多个在DTPs中上调的基因显著富集于NFkB和STAT3信号通路。我们假设,通过抑制这些信号通路联合第三代TKI奥希替尼(Osi)治疗,可消除DTPs形成并克服EGFRmut LUAD对Osi的耐药性。本研究旨在通过基因干预RELA和STAT3来抑制NFkB和STAT3信号通路,以验证其是否能增强LUAD模型对Osi的敏感性。

方法

采用CRISPR介导的基因编辑技术,在EGFRmut LUAD细胞系PC9和HCC4006(均携带EGFR外显子19缺失)中构建RELA和STAT3功能缺失(LOF)模型。将靶向RELA和STAT3的向导RNA(sgRNA)慢病毒质粒或阴性对照AAVS1转导至Cas9+细胞,并通过免疫印迹验证克隆衍生细胞系的蛋白表达缺失。采用2μM Osi处理细胞系3天,通过流式细胞术检测基因LOF对细胞凋亡的影响。通过克隆形成实验评估RELA和STAT3 LOF细胞的DTPs形成能力:用2μM Osi处理12天后,对存活的耐药克隆进行磺酰罗丹明B染色计数。

结果

目前我们证实,PC9和HCC4006细胞经短期和长期Osi处理后,RELA转录水平上调,而STAT3 mRNA表达下调。RELA和STAT3 LOF增强了Osi急性治疗诱导的细胞凋亡,提示STAT3和RELA驱动机制参与调控对Osi的治疗反应。此外,与对照组相比,RELA和STAT3 LOF显著降低了Osi处理细胞的克隆形成能力,进一步表明这些基因参与调控DTPs的生存。

结论

PC9和HCC4006 DTPs中RELA的上调证实NFkB信号通路是潜在的DTPs生存机制。这提示NFkB激活可能是EGFRmut LUAD细胞系和PDX模型中普遍存在的耐药机制。Osi联合STAT3和RELA LOF所观察到的凋亡增加与克隆形成能力降低,凸显了这两个靶点在消除DTPs生存方面的治疗潜力。这些发现可为预防EGFRmut LUAD患者奥希替尼治疗后肿瘤复发提供新的干预策略。


责任编辑:肿瘤资讯-丹忱
排版编辑:肿瘤资讯-丹忱



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