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【前沿进展】揭示新机制：YAP介导HER3信号通路激活导致RET靶向药物耐药

03月15日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

近年来，分子靶向治疗已成为驱动基因阳性肿瘤治疗的重要策略。RET基因融合作为一种重要的致癌驱动因素，在非小细胞肺癌（NSCLC）中占比1-2%，在甲状腺乳头状癌中占比5-10%。近年来，高选择性RET酪氨酸激酶抑制剂（RET-TKIs）在临床研究中显示出较好疗效。然而，大多数患者最终会发生获得性耐药。研究表明，RET-TKIs的获得性耐药主要通过靶点依赖（on-target）和非靶点依赖（off-target）机制重新激活MAPK信号通路。因此，深入阐明RET-TKIs治疗早期的适应性耐药机制，对于开发新的治疗策略和改善患者预后具有重要意义。近期，Clinical Cancer Research刊登的一项研究旨在探讨YAP介导的HER3信号通路在RET突变癌细胞对RET-TKIs产生早期适应性耐药的分子机制，并寻找克服耐药的新策略^[1]。【肿瘤资讯】整理主要内容，以飨读者。

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研究团队采用系统性研究方法，利用四种RET突变癌症细胞系（包括肺腺癌、甲状腺癌和间皮瘤细胞）评估其对RET-TKIs的敏感性，并通过RNA测序、磷酸化受体酪氨酸激酶（RTK）抗体芯片、染色质免疫沉淀（ChIP）分析和荧光素酶报告基因等技术手段，揭示了RET-TKIs治疗过程中的适应性耐药机制。同时，研究团队收集了23例接受RET-TKIs治疗的RET融合阳性NSCLC患者的临床标本，以验证研究治疗前YAP表达与治疗结果的相关性。

主要结果

YAP介导的HER3信号通路激活与ERK再活化

研究团队首先评估了四种RET突变癌症细胞系（LC-2/ad、TPC-1、TT和EHMES10）对RET-TKIs的敏感性。结果显示，EHMES10（NCOA4-RET融合阳性间皮瘤）和TT（RET C634W突变甲状腺髓样癌）细胞对RET-TKIs高度敏感，而LC-2/ad（CCDC6-RET融合阳性肺腺癌）和TPC-1（CCDC6-RET融合阳性乳头状甲状腺癌）细胞敏感性较低。Western blot分析发现，在敏感细胞系中，RET-TKIs处理可持续抑制ERK磷酸化；而在低敏感细胞系中，ERK磷酸化在4小时被抑制后在48小时出现再活化。通过磷酸化RTK抗体芯片分析发现，RET-TKIs处理后，多个分子如HER3、IGF1-R、胰岛素受体和FGFR3的磷酸化水平升高。进一步研究证实，HER3敲低可显著增强RET-TKIs的抑制效果，且HER3敲低联合RET-TKIs可更有效地抑制ERK和AKT磷酸化。

机制研究显示，RET-TKIs处理不仅增加了HER3的磷酸化和总表达水平，还上调了其配体NRG1的mRNA和蛋白表达。免疫共沉淀实验证实，RET-TKIs处理促进HER3与EGFR和HER2形成异二聚体（图1）。

图1 RET-TKIs治疗过程中适应性反应诱导HER3活化和ERK再活化

RNA测序和转录因子分析发现TEAD1和TEAD4在RET-TKIs处理后上调。进一步研究证实，YAP敲低可抑制RET-TKIs诱导的HER3活化和ERK再活化，同时降低NRG1的表达水平，增强细胞对RET-TKIs的敏感性（图2）。这些发现首次阐明了YAP作为HER3的直接转录因子在适应性耐药中的作用。

图2 由YAP激活的HER3介导了适应性耐药的产生.png 图2 由YAP激活的HER3介导了适应性耐药的产生

YAP表达水平与RET-TKIs疗效的相关性

通过对细胞系的分析发现，YAP基础表达水平与RET-TKIs的敏感性呈负相关。在对RET-TKIs敏感性较低的细胞中YAP表达水平较高。进一步研究发现，在YAP表达较低的TT细胞中过表达YAP可增加HER3表达，降低对RET-TKIs的敏感性，并轻微增加RET-TKIs诱导的ERK磷酸化（图3）。在TPC-1细胞中过表达YAP也产生类似效果。这些结果提示YAP可能是预测RET-TKIs疗效的潜在生物标志物。图3 在YAP表达较低的TT细胞中过表达YAP导致HER3表达上调和ERK磷酸化水平轻度升高.png

图3 在YAP表达较低的TT细胞中过表达YAP导致HER3表达上调和ERK磷酸化水平轻度升高

联合治疗策略克服适应性耐药

基于上述发现，研究团队探索了靶向YAP/HER3通路联合RET-TKIs的治疗策略。体外实验显示，泛ErBB抑制剂EGFR-TKIs可显著增强YAP高表达RET异常肿瘤细胞对RET-TKIs的敏感性。在细胞水平，联合治疗能够协同抑制ERK和AKT信号通路的活化，诱导G1期细胞周期阻滞和细胞凋亡。长期培养实验表明，联合治疗可有效预防耐药细胞的出现。在耐药细胞中，HER3表达显著上调，EGFR-TKIs单药即可抑制其增殖（图4）。提示HER3信号通路在耐药细胞的存活中起关键作用。此外，YAP-TEAD复合物抑制剂维替泊芬（verteporfin）和K-975也显示出类似的增敏作用。

图4 泛ErBB抑制剂可增强YAP高表达RET突变癌细胞的敏感性并预防耐药性发生.png

图4 泛ErBB抑制剂可增强YAP高表达RET突变癌细胞的敏感性并预防耐药性发生

在裸鼠移植瘤模型中，EGFR-TKIs联合RET-TKIs较单药治疗表现出更强的抗肿瘤效果，且未观察到明显毒性。免疫组化分析显示，联合治疗组Ki-67阳性增殖细胞比例和磷酸化ERK表达水平显著降低，证实了体外实验结果的可靠性

为验证这一发现的临床相关性，研究团队分析了23例接受RET-TKIs治疗的RET融合阳性NSCLC患者的临床标本。免疫组化结果显示，治疗前肿瘤组织中细胞质YAP高表达YAP高表达与较短的无进展生存期（中位PFS：10.1个月 vs. 未达到，P=0.09）和总生存期（P=0.04）显著相关（图5）。这一发现与体外实验结果相吻合，提示细胞质YAP表达水平可能成为预测RET-TKIs治疗效果的潜在生物标志物。

图5 治疗前细胞质YAP表达水平对RET融合阳性NSCLC患者接受RET-TKIs治疗预后的影响

结语

本研究首次揭示了YAP介导的HER3信号通路激活在RET突变癌症早期耐药中的关键作用，确立了YAP表达作为预测生物标志物的价值，并提出了有效的联合治疗策略。这些发现不仅深化了对分子靶向治疗耐药机制的认识，也为提高RET异常肿瘤患者的治疗效果提供了新的思路和方向。

参考文献

1. Katayama, Y., et al., YAP regulates HER3 signaling-driven adaptive resistance to RET inhibitors in RET-aberrant cancer. Clinical Cancer Research, 2024.

声明：本材料由阿斯利康提供，仅供医疗卫生专业人士参考

审批编号 CN-150775 过期日期 2025-3-27

责任编辑：肿瘤资讯-Yuno
排版编辑：肿瘤资讯-ZLG

03月17日

乐凌云

余姚市人民医院 | 肿瘤内科

感谢分享好好学习

03月16日

199****0614

医学SCI

03月15日

尚瑞国

鹤壁市人民医院 | 肿瘤内科

肿瘤的研究早已进入了分子基因水平，研究肿瘤发生发展机制，更好的预防和治疗肿瘤。