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CD16+ 或可作为侵袭性B-NHL/DLBCL患者早期复发的预测标志物

10月12日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

近日，来自德国综合生理学和分子医学中心（CIPMM）的Eva C. Schwarz教授等人于Molecular Cancer杂志发表一项研究报告，发现在最初的血液分析中对免疫细胞亚群的CD16评估可以准确预测24个月内的复发。令人惊讶的是，与CD16+ NK细胞计数相比，CD16+ T细胞计数（T细胞的一小部分）和CD16+单核细胞与患者预后的相关性更强。在接受R-CHOP方案治疗的侵袭性B 细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）/弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者中，CD16+ T细胞计数与无进展生存期（PFS）呈正相关，而CD16+单核细胞计数则显示负相关。此外，结合评估CD16+ T细胞和CD16+单核细胞计数可以进一步提高复发预测的准确性。这些数据可能有助于为特定患者群体制定个性化治疗策略。

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这是一项前瞻性研究，分析了46例新诊断非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者在不同治疗阶段的外周血样本。大多数患者（85%）为DLBCL，13%的患者为患有其他形式的高级别NHL，1例患者起初为侵袭性滤泡性淋巴瘤，后来进展为DLBCL。

患者中位诊断年龄为67岁，25例性别和年龄匹配的健康对照者的中位年龄为66岁。在这些患者中，59%患有晚期疾病（Ann-Arbor Ⅲ-Ⅳ期）。根据国际预后指数（IPI）评分，54%的患者被归类为中低风险（IPI 0-2），46%为中高风险（IPI 3-5）。

CD16+ T 细胞的比例比 CD16+ NK 细胞的比例更能预测PFS

研究人员对新诊断NHL患者的外周血单个核细胞（PBMC）进行了流式细胞术分析，以测定CD16+细胞在白细胞中的比例，因这些细胞能与利妥昔单抗结合并可能影响治疗。结果显示，NHL患者与健康对照者间，CD16+ NK细胞在CD45+白细胞中的比例无显著差异（9.0% vs. 8.0%，P=0.93）。CD16+ NK细胞比例高低与患者PFS无相关性（P=0.86）。同时，CD16+ T细胞（占CD45+白细胞的小部分，表达CD4、CD8和/或CD56）在患者与健康对照者间的比例也无显著差异（1.1% vs. 1.5%，P=0.27）。

值得注意的是，CD16+ T细胞表达CD16的水平较低，但其高比例（>1.6%）的患者显示出显著更好的PFS（P=0.02）。此外，患者风险等级（根据国际预后指数IPI）与CD16+ T细胞比例无相关性。Cox回归分析确认，即使在考虑IPI的情况下，高比例CD16+ T细胞的患者仍有明显的PFS优势（HR=0.12，P=0.04）。因此，CD16+ T细胞比例的升高是侵袭性B-NHL/DLBCL患者PFS改善的独立预后标志。
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图1. 高比例的CD16+ T细胞可预测患者的预后

CD16+ T细胞对化疗的敏感性较低，并且与CD16+ NK细胞相比，展现出更快且更有效的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）能力

观察发现，CD16+ T细胞对PFS的影响大于CD16+ NK细胞，尽管NK细胞通常被认为是ADCC的主要介质，且其初始比例远高于CD16+ T细胞。治疗过程中，CD16+ NK细胞比例显著下降，而CD16+ T细胞比例下降幅度较小，且治疗结束时完全恢复。计算每微升血液中两者的绝对计数也得出类似结果。

为探究CD16+ T细胞预后相关性更高的机制，研究人员比较了两者的ADCC效率。通过磁珠分离NK和T细胞并进行ADCC细胞毒性测定，结果显示，尽管CD16+ T细胞杀死目标细胞的比例较低，但其效率大约是CD16+ NK细胞的4倍（基于单个患者样本）。对所有功能分析的患者计算后，CD16+ T细胞的ADCC能力大约是CD16+ NK细胞的8倍。进一步通过流式细胞术对两者进行分选，并在单细胞水平上进行直接比较，发现CD16+ T细胞通过ADCC更有效地杀死目标细胞，这主要是由于其细胞溶解动力学更快。

研究人员假设，CD16+ T细胞百分比与PFS的正相关是由其较高的化学抗性和更有效的ADCC能力所解释。

CD16+单核细胞的高水平与PFS降低相关

不同与CD16+ NK细胞和T细胞百分比在患者和健康对照组中相似的情况，NHL患者诊断时CD16+单核细胞百分比显著高于健康对照组（中位数10.0% vs. 4%，P<0.0001）。CD16+单核细胞百分比增高（>10%）的患者PFS显著更差（P=0.0003）。中高风险患者CD16+单核细胞百分比显著高于低到中风险患者（中位数15.7% vs 9.9%，P=0.003）。调整IPI的Cox回归分析显示，较高CD16+单核细胞百分比与较差PFS相关，而IPI影响较小。总之，CD16+单核细胞百分比是NHL患者PFS降低的强有力、独立预后标志物。共培养实验显示，利妥昔单抗存在下单核细胞吞噬肿瘤细胞显著增加，但吞噬后PD-L1上调可能抑制NK和T细胞活性，从而解释患者由于ADCC介质受损导致的更差PFS。
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图2. CD16+ 单核细胞比例过高会对患者的预后产生负面影响

高比例的CD16+ T细胞可以抵消高比例CD16+单核细胞患者降低的PFS

尽管IPI是侵袭性B-NHL/DLBCL患者风险分层的标准，但小样本量研究中高IPI患者PFS趋势不显著。然而，高（4-5）与低（0-1）IPI评分患者间PFS差异显著。重要的是，中等IPI评分患者预后信息不足。考虑到CD16+ T细胞和CD16+单核细胞百分比对PFS有显著影响，Cox回归分析显示仅高比例CD16+单核细胞（>10%）和低比例CD16+ T细胞（<1.6%）患者PFS显著降低。高比例CD16+单核细胞与高于1.6%的CD16+ T细胞比例时，对PFS负面影响轻微。两组均低时，PFS降低风险低。高比例CD16+ T细胞和低比例CD16+单核细胞几乎不影响PFS。仅5例患者同时具有高比例两种细胞，表明它们非独立。KaPlan-Meier生存分析显示，高比例CD16+单核细胞和低比例CD16+ T细胞患者中位生存期短，而其他亚群患者大多在研究结束时仍缓解（P<0.0001）。风险比为13.9，Harrell’s C指数为0.80，表明风险模型拟合良好。

总之，本研究提供了诊断时评估侵袭性B-NHL/DLBCL患者风险的新方法，即使在有限样本中也实现了高统计功效。所需分析快速、易行，为个性化治疗提供了可能性。

总结

本研究确定了侵袭性B-NHL/DLBCL患者的新预后标志物：CD16+单核细胞和CD16+ T细胞结合可预测复发概率，风险比高达13.9。在46例患者中，该联合分析统计功效极高。但研究存在两大限制：一是使用PBMCs而非全血分析，二是结果尚未在更大队列中验证。流式细胞术分析CD45、CD14、CD3和CD16抗体可确定这些细胞数量。CD16+单核细胞增多通常预示不良预后，但本研究发现CD16+ T细胞增多是保护性因素。

尽管关于CD16+ T细胞在B-NHL/DLBCL中的功能研究尚少，但本研究表明其可改善PFS，并抵消高比例CD16+单核细胞的不良影响。结合分析这两个亚群，有望为侵袭性B-NHL/DLBCL患者提供更个性化的治疗。本研究结果为根据初始血液分析结果调整治疗方案提供了理论基础。

参考文献

Zöphel S, Küchler N, Jansky J, et al. CD16+ as predictive marker for early relapse in aggressive B-NHL/DLBCL patients[J]. Molecular Cancer, 2024, 23(1): 210.

责任编辑：Mathilda
排版编辑：Mathilda