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【2022 EHA 抢先看】ALL oral 大揭晓 !PDX体内筛查发现获得性的异质性化疗耐药的共同治疗靶点

2022年05月27日
编译:月下荷花
来源:肿瘤资讯

2022年6月9日至12日,由欧洲血液学会(EHA)主办的第27届欧洲血液学大会/年会将在奥地利维也纳举行。该会议是全球血液学领域规模最大的国际会议之一,涵盖血液学研究的各个方面,旨在提高血液疾病的诊疗、展示创新技术、诊断工具和风险评估策略、促进多方合作。2022年6月11日Wirth教授等将口头报告其研究结果,该研究显示传统多药化疗后ALL PDX模型通过获得并行进展的基因组异质性改变而耐药,单药治疗(如BCL2抑制)可使肿瘤重新恢复对传统化疗的敏感性。【肿瘤资讯】特将相关内容整理如下供临床医生参考。

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PDX体内筛查发现获得性的异质性化疗耐药的共同治疗靶点

摘要号:S110

原标题:IN VIVO PDX CRISPR/CAS9 SCREENS REVEAL MUTUAL THERAPEUTIC TARGETS TO OVERCOME HETEROGENEOUS ACQUIRED CHEMO-RESISTANCE

会议类型:Oral ,6/11

发言人:Anna-Katharina Wirth

研究背景

获得性传统多药化疗耐药导致疾病复发和预后不良,是目前需要解决的主要临床问题。

目的

鉴定能克服获得性化疗耐药的治疗。

研究方法

将急性淋巴细胞白血病(ALL)作为模型疾病,对原位患者衍生异种移植物(PDX)模型进行长期治疗后,分析多组学特征,并对功能性基因组CRISPR/CAS9筛选。

研究结果

研究使用了传统化疗方案,允许小鼠进行连续18周治疗,使用的药物是广泛应用的环磷酰胺和长春新碱。通过重复体内成像监测三个荧光素酶-转基因PDX模型。最初几周多药化疗能明显降低ALL细胞,证明初始化疗敏感。连续治疗后,小鼠肿瘤负荷处于微小残留病水平数周,最后尽管继续治疗,但肿瘤重新恢复生长,表明发生获得性耐药。

对一个典型的PDX模型进行复制产生了8个耐药衍生体,并鉴定每个衍生体的特征。基因组分析表明,不同衍生体间存在明显的基因组异质性,每个耐药衍生体都在耐药相关区域发生了不同拷贝数改变和不同点突变,如TP53。与基因组异质性相反,转录组和蛋白质组分析发现敏感细胞和耐药细胞之间存在一组基因的差异表达,但在所有衍生体中表达相似。

为了明确潜在机制并鉴定能克服获得性耐药的治疗靶点,对每个耐药PDX衍生体进行了定制的CRISPR/CAS9体内筛选,以明确治疗下约200个候选基因的相关性。靶向BCL2、BRIP1或COPS2的sgRNA在体内筛选中脱落。单个敲除实验证实,敲除BCL2、BRIP1或COPS2任一可使PDX ALL细胞对化疗重新敏感。与直接转化相关的是,采用BCL2抑制剂ABT-199治疗可使得耐药的PDX细胞对体内多药化疗敏感。有趣的是,BCL2抑制能独立恢复具有高度复杂遗传学改变的耐药衍生体对治疗的反应,如在±TP53突变克隆中。

结论


综上所述,这项研究建立了一种高度临床相关的获得性传统化疗耐药的PDX体内模型。使用该模型证明了在复制小鼠中并行进展的基因组异质性改变,通过单药治疗即可使肿瘤对传统化疗重新敏感。

参考文献

Wirth A, et alIN VIVO PDX CRISPR/CAS9 SCREENS REVEAL MUTUAL THERAPEUTIC TARGETS TO OVERCOME HETEROGENEOUS ACQUIRED CHEMO-RESISTANCE. EHA Library. Wirth A. 06/11/22; 356970; S105

 


责任编辑:Luna
排版编辑:Luna



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