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【 2020ASH·白血病篇】CD22设门流式细胞术检测CD19 CAR-T治疗后复发B-ALL，更具成本效益

2020年12月01日

来源：肿瘤资讯

2020年新冠疫情全球肆虐，但疫情并未阻挡血液界对学术研究、临床实践的不断探索与交流。2020年12月5-8日，第62届美国血液学会年会（ASH 2020）首次以线上形式召开。作为全球血液学领域最大最权威的国际学术盛会之一，ASH每年都会吸引来自全球100多个国家的近三万名血液学专家、学者和其他相关医疗保健专业人士参会，会议期间将有超过数千多份摘要呈现。

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近年来，CAR T细胞治疗恶性血液肿瘤取得的成功引起人们对免疫治疗领域的极大兴趣。流式细胞术(FCM)是检测CAR-T细胞治疗后肿瘤细胞残留情况的最重要的方法之一。

在FCM分析中，CD19一直是B细胞设门的经典标记。然而，复发/难治B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）病例接受CD19 CAR-T细胞治疗后，B细胞CD19的表达丢失使得CD19设门法不再适用于流式分析。在这种情况下，通常会采用胞浆CD79a（cCD79a）代替CD19作为B细胞设门标记。然而，cCD79是胞内染色，比较费时，有时会有非特异性染色，还可能因破膜和洗涤步骤造成细胞丢失以致没有足够的细胞进行分析。 CD22是另外一个泛B标记，也可能成为CD19 CAR-T治疗后B细胞设门的一种选择。本次ASH大会上，高博医学诊断中心流式细胞实验室喻新建主任报告了团队比较CD22和cCD79a在CD19阴性复发B-ALL患者中的表达，评估CD22作为CAR-T治疗后B细胞设门标记可能性的研究数据。

研究共纳入40例CD19-CART治疗后CD19阴性复发的B-ALL患者，包括14例成人和26例18岁以下儿童，中位年龄12岁（范围1～64岁）。这些患者的骨髓标本均同时检测cCD79a和CD22的表达。标准panel由CD45、CD19、CD22、CD10、CD20、CD34、CD38、CD58、cCD79a、CD81、HLA-DR和CD123组成。根据患者初诊的免疫表型可添加额外抗体。

检测结果显示，40例患者（100%）B细胞cCD79a为正常荧光强度表达。CD22在所有病例中均见表达，其中33例（82.5%）为正常荧光强度表达，7例（17.5%）为部分或弱表达（P/D）。CD22在P/D表达时不适合作为设门标记。为了弄清CD22 P/D表达是否与CD19 CAR-T治疗相关，研究回顾了该7例患者CAR-T治疗前的免疫表型，发现4例患者CD22为 P/D表达，3例患者CD22为正常强度表达。排除4例治疗前CD22 P/D表达的患者后，91.7%（33/36）的患者CD22和cCD79a表达一致，表明CD22在绝大多数情况下可作为CD19治疗后病例的B细胞设门标记。

综上，我们的研究数据显示，在82.5%～91.7%的CD19 CAR-T治疗后复发病例，仅用CD22设门可有效识别B细胞。与cCD79a设门相比，CD22设门不失为一种兼具成本效益且省时省力的常规检测策略。在CD22部分表达或弱表达的患者中，才需采用cCD79a设门。

参考文献

https://ash.confex.com/ash/2020/webprogram/Paper139437.html

责任编辑：Amiee
排版编辑：亚楠

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