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【2019ASH现场直击】山东省立医院王欣教授团队口头报告阻断YAP或可成为DLBCL的新型疗法

2019年12月12日

编译：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

第61届美国血液学会（ASH）年会于2019年12月7-10日在美国奥兰多隆重举行。该会议是血液病领域首屈一指的学术会议，汇集了全球血液病临床和实验科学家，共同探讨血液病领域的新技术、新进展。会议期间，山东大学附属省立医院的王欣教授及周香香医生团队（摘要号：808）报告了一项阻断Yes-associated protein（YAP）用于治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的研究，研究结果显示阻断YAP有望成为治疗DLBCL的一种新型疗法。

王欣

主任医师、教授、博士生导师

山东省立医院血液科主任
山东大学临床医学院院长
卫生部突出贡献中青年专家
国务院特殊津贴特聘专家
泰山学者攀登计划特聘教授
中华医学会血液学分会委员
中国医师协会血液学会常务委员
中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会委员
山东省医师协会血液分会主任委员
山东省医学会诊断学分会主任委员
山东省医学会血液学分会副主任委员
美国血液协会ASH会员

标题：Blockade of Yes-Associated Protein As a Novel Therapeutic Approach in Diffuse Large B-Cell Lymphoma
时间：Monday, December 9, 2019: 5:15 PM
地点：W304ABCD, Level 3 (Orange County Convention Center)

周香香医生在ASH现场进行大会发言

Oral 808研究详情

研究背景

Yes-associated protein（YAP）是Hippo信号传导的重要转录调节因子和效应子，已成为几种人类恶性肿瘤中新的决定因素。Verteporfin（VP），一种临床上用于治疗黄斑变性的光敏剂，最近被认为可以作为一种不依赖光活化的YAP抑制剂。然而，Hippo-YAP在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中的功能和机制仍不清楚。在该研究中，我们研究了YAP的功能意义，并提出了一种新的DLBCL治疗策略。

研究方法

在知情同意后，收集了60例新诊断的DLBCL患者和30例反应性增生患者的淋巴结活检。通过RNAi介导的敲降和CRISPR / Cas9介导的基因组删除，评估YAP的生物学功能。使用RNA测序检测YAP敲除的DLBCL细胞中失调的RNA。采用GO和KEGG富集分析探索差异表达RNA的功能。采用SCID-Beige小鼠建立DLBCL异种移植模型。根据动物保健机构的原则进行动物实验。

研究结果

我们首先检查了Oncomine数据库中YAP的表达，并发现在DLBCL细胞中YAP mRNA的上调。并在一组新诊断的DLBCL患者（N=60）中验证了YAP蛋白的高表达。生存分析表明，YAP表达与侵袭性的疾病过程有关（P=0.014）。

DLBCL微阵列图谱中YAP的功能富集分析显示YAP丰富了细胞过程和生物学调控。敲降YAP（shYAP）可以显著抑制细胞增殖并促进细胞周期停滞。VP以剂量和时间依赖性方式抑制DLBCL细胞的增殖。VP显著的促进了DLBCL细胞的凋亡和细胞周期停滞。VP以剂量依赖的方式显著抑制了YAP和TEAD的蛋白表达水平。另外，VP显著抑制YAP靶向基因的mRNA表达。在STRING数据库中建立了YAP相互作用的基因组网络富集。

为了验证YAP参与DLBCL发病机制，我们通过CRISPR / Cas9基因组编辑系统删除YAP表达。YAP缺失（sgYAP）导致显著减少了细胞增殖和细胞周期停滞。为了进一步探索体内抑制YAP的作用，通过YAP缺失的LY1细胞系建立异种移植DLBCL小鼠模型。与对照组相比，具有YAP缺失的肿瘤显示出生长受抑以及Ki67和C-myc的表达水平降低。

为了进一步探讨YAP在DLBCL中的调控机制，我们通过全转录组测序（RNA-seq）对mRNA和非编码RNA（ncRNA）表达谱进行了综合分析，筛选出YAP敲除的DLBCL细胞中显著差异表达（DE）的RNA。随后的GO和KEGG富集分析表明，DE的RNA主要与细胞代谢过程和途径有关。此外，进一步建立了miRNA-circRNA网络。

结论

综上所述，这些发现为YAP在淋巴瘤发生中的关键作用提供了体外和体内的临床前证据，并突显了阻断YAP在DLBCL中是一种具有吸引力的疗法。临床使用的光敏剂维替泊芬（Verteporfin）通过破坏YAP-TEAD复合物发挥抗肿瘤作用。进一步研究YAP在DLBCL中的调节机制，有望为DLBCL的治疗提供基于该基因的新的选择。

王欣教授现场点评

DLBCL的临床诊疗现状

DLBCL是非霍奇金淋巴瘤（NHL）中最常见的类型，目前DLBCL的发病机制目前尚不明确，且该病具有高度的侵袭性和异质性，临床预后差。

尽管随着科学技术的不断进步，CD20单克隆抗体、CAR-T、PD-1等新型治疗技术的不断涌现，DLBCL的化疗疗效得以部分提高，但仍有约1/3的患者初治耐药或缓解后复发而不能治愈，这部分患者即使接受包括新药或高强度联合化疗等挽救性治疗，也难以获得长期生存。因此，临床诊疗中依然面临诸多挑战，出常见因素的高危患者外，如高龄患者、高侵袭性、特殊分子基因表达等仍不确定的因素存在等患者，亟需个体化诊疗措施以改善DLBCL患者的疗效及预后。

DLBCL内存在多种基因及信号通路活化异常，通过对DLBCL细胞的增殖、凋亡等生物学行为进行精确调控，介导DLBCL发生发展，深入开展DLBCL发病相关分子靶点及机制研究，有望为NHL的个体化诊疗提供新的科学依据。

YAP如何参与DLBCL发病

我们近期开展了Yes-associated protein (YAP)参与和调控DLBCL发生发展的作用及机制研究。YAP 是Hippo信号通路下游的主要效应因子, 起着介导细胞信号转导、调控转录因子的作用，在控制器官发育、调控细胞生长中起着十分重要的作用。我们通过在DLBCL中开展相关功能学研究发现，YAP主要通过调控细胞增殖参与DLBCL的发生发展。

研究所带来的启示

我们的前期研究已在DLBCL细胞株中验证了维替泊芬的体外抗肿瘤作用，目前正在利用DLBCL小鼠动物模型通过体内动物实验研究和探讨，拟将进一步深入探究维替泊芬的体内抗肿瘤效用及相关机制。希望通过此项研究，为DLBCL的发病机制及潜在的治疗和预后靶标提供新的理论依据。