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2026 AACR｜靶向内体-溶酶体运输通路克服三阴性乳腺癌紫杉醇耐药

04月21日

编译：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

Session Type

Late-Breaking Poster Sessions

Session Title

LBPO.TB02. Late-Breaking Research: Tumor Biology 2

摘要号

LB315 / 15

英文标题

Targeting endolysosomal trafficking to overcome paclitaxel resistance in triple-negative breast cancer

中文标题

靶向内体-溶酶体运输通路克服三阴性乳腺癌紫杉醇耐药

讲者

Rajiv Pathak, Prabhash Nath Tripathi, Veronica Piedra, Chandrabose Karthikeyan, Amit K. TiwariUniversity of Arkansas for Medical Sciences, Little Rock, AR

背景

紫杉烷类药物是三阴性乳腺癌（TNBC）治疗的主要手段，但超过90%的转移性病例会出现获得性紫杉醇耐药，导致患者缺乏获批的二线治疗方案，5年生存率低于30%。耐药TNBC细胞通过上调两条互补的内体-溶酶体通路实现生存：巨胞饮作用以获取营养，以及保护性自噬以隔离/降解紫杉醇。这两个过程均关键依赖于脂质激酶PIKfyve及其产物PI(3,5)P₂。我们开发了低纳摩尔级PIKfyve抑制剂，通过显著增强巨胞饮介导的紫杉醇摄取，同时阻断自噬流，将耐药TNBC细胞对内体-溶酶体运输通路的依赖性转化为选择性杀伤效应。

方法

采用理性设计合成PIKfyve抑制剂，通过ADP-Glo法评估激酶抑制活性。使用紫杉醇耐药TNBC细胞（SUM159PT/PAC200；PTX IC₅₀＞1000 nM）进行抑制剂±紫杉醇处理。通过70 kDa FITC-葡聚糖摄取（流式细胞术/共聚焦显微镜）±EIPA（25 µM）定量巨胞饮作用。采用LC3-II/p62免疫印迹评估自噬流。通过72小时磺酰罗丹明B（SRB）和MTT法测定细胞活力，使用Chou-Talalay联合指数（CompuSyn）计算协同效应。在SUM159PT/PAC200细胞来源的类器官中进一步评估PIKfyve抑制剂对紫杉醇增敏和凋亡诱导作用。所有实验均设三次重复，采用单因素方差分析及Dunnett事后检验进行统计学显著性分析。

结果

先导PIKfyve抑制剂（PSG-06和PSG-09）在10 µM浓度下可强力诱导巨胞饮作用（葡聚糖摄取增加＞3倍），同时完全阻断自噬流（出现显著p62积累）。这种双重效应显著增强细胞内紫杉醇蓄积并恢复药物敏感性，在临床相关紫杉醇浓度（5-20 nM）下获得低至0.64的联合指数，使细胞活力降低＞50%，并诱导细胞周期阻滞和凋亡。巨胞饮抑制剂EIPA完全消除增敏效应，证实了靶向作用机制。值得注意的是，PSG诱导的效应具有可逆性，为紫杉醇蓄积和细胞毒性提供了短暂时间窗，可能减少持续巨胞饮和自噬抑制相关的长期毒性。此外，Western blot检测切割PARP证实，PSG-6联合紫杉醇可在紫杉醇耐药的SUM159PT/PAC200三维类器官中诱导剂量依赖性凋亡。

结论

低纳摩尔级PIKfyve抑制剂通过阻断PIKfyve同时驱动巨胞饮介导的紫杉醇摄取并抑制保护性自噬，在耐药TNBC细胞中形成强效的协同致死组合。这种单分子双效策略可绕过P-糖蛋白外排，阻止紫杉醇的自噬隔离与降解，为紫杉烷类耐药TNBC及其他巨胞饮依赖性肿瘤提供了明确的转化路径。

责任编辑：Amiee
排版编辑：Amiee