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【2019IMW抢先看】过继细胞疗法CAR NK-92治疗骨髓瘤：NKG2D vs BCMA（OAB-035）

2019年08月29日

编译：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

第17届国际骨髓瘤研讨会将于2019年9月12-15日在美国波士顿举行。该会议是骨髓瘤领域首屈一指的学术会议，旨在汇聚骨髓瘤临床和实验科学家，共同探讨骨髓瘤相关的创新技术、新进展以及对存在争议的问题。作为本次会议的Late-Breaking Abstract，OAB-035研究将目光集中于基因编辑的NK细胞在多发性骨髓瘤中的应用，针对新型靶点研发出NKG2D CAR-NK细胞，并证实其疗效。

背景

尽管CAR-T细胞疗法在多发性骨髓瘤（MM）中表现出令人印象深刻的初步疗效，但相比之下，NK细胞工程疗法是一种更有竞争性和更安全的方法。NK-92细胞是一种通用、便宜且快捷的细胞治疗，已应用于临床试验。该类细胞已被报道可在MM中产生一定作用，而通过遗传修饰可以进一步增强其肿瘤杀伤作用。目前为止，有两项临床前研究报道了CAR-NK92细胞在MM中的应用，靶点分别为CD138和CS1（SLAMF7）。由于靶点在非肿瘤细胞的表达和自我杀伤，研究结果尚有争议。该研究旨在研发和比较两种新型CAR-NK92细胞在MM中的疗效。

材料和方法

通过慢病毒将人NKG2D受体胞外域序列或抗BCMA scFv单链抗体整合至NK-92MI细胞。二者均包含相同的4-1BB共刺激和CD3-ζ信号结构域。采用相同病毒浓度（MOI 10）干扰细胞以便比较二代NKG2D-CAR和BCMA-CAR的疗效，使用FACS分选纯化获得稳定的修饰后细胞系，qPCR测定载体拷贝数以保证相同的CAR表达水平。使用3小时钙黄绿素分析进行细胞毒试验。使用的MM细胞系具有不同的靶点表达水平，U266和ARP-1细胞系高表达BCMA和NKG2D;XG-1细胞系高表达BCMA，低表达NKG2D;NCI H929 R20细胞系低表达NKG2D,K562为白血病细胞系，不表达BCMA，高表达NKG2D。

结果

以U266、ARP-1、XG-1和NCI H929 R20为靶细胞，结果显示NKG2D-CAR-NK-92MI体外抗肿瘤活性始终高于亲代NK-92MI细胞，分别为84 ± 2% vs 40.7 ± 4% (E:T 1:1), 82.1 ± 4% vs 21.3 ± 9.2%(E:T 16:1)；67.9 ± 9% vs 21.3 ± 9.2% (E:T16:1)；50.9 ± 6% vs 23.7 ± 2%，(E:T 16:1)。研究者随后比较了NKG2D和BCMA NK-92MI对上述细胞系的杀伤作用，结果如下：U266 细胞系中为84 ± 2% vs 91.9 ± 3% (E:T 1:1)，ARP-1中为82.1 ± 4% vs 80.4 ± 3.7%(E:T 16:1)，XG-1 中为67.9 ± 9% vs 89.9 ± 2%(E:T 16:1)，K562中为94 ± 3% vs 25.74 ± 4%(E:T 16:1)，在BCMA和NKG2D都是高表达且水平相似的细胞系中，NKG2D-CAR NK细胞和金标准CMA-CAR对肿瘤杀伤作用无明显差异，这也提示了肿瘤表面靶点表达水平与两种CAR细胞杀伤效应的相关性。CAR-NK 92MI细胞对正常人外周血单个核细胞无杀伤作用，以MM原位异种移植小鼠模型为研究对象的体内实验正在进行。

结论

研究者开发出两种新型稳定的CAR NK-92细胞，提高了亲代细胞的肿瘤杀伤效应。在多种细胞系中，NKG2D-CAR与BCMA-CAR细胞疗效相当，研究证实了该“现成”方法治疗MM的可行性。

参考文献

Maroto EE, Encinas J, García OA,et al. OAB-035.EXPLORING NKG2D AND BCMA-CAR NK-92 FOR ADOPTIVE CELLULAR THERAPY TO MULTIPLE MYELOMA.

责任编辑：Amiee