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【2019IMW抢先看】无创性揭示MM遗传学特征——循环肿瘤细胞(CTCs)检测(OAB-084)

2019年08月27日
编译:肿瘤资讯
来源:肿瘤资讯

2019年第17届国际骨髓瘤研讨会将于2019年9月12-15日在美国波士顿举行。该会议是骨髓瘤领域首屈一指的学术会议,旨在汇集骨髓瘤临床和实验科学家,共同探讨骨髓瘤相关的创新技术、新进展以及对存在争议的问题。作为本次会议的LBA,本研究显示无创性循环肿瘤细胞(CTCs)检测与骨髓克隆性浆细胞、髓外浆细胞瘤遗传学图谱高度一致,可作为MM患者骨髓内外遗传学图谱的可靠替代检测方式。

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背景

由于骨髓取材的局限性、空间基因组异质性或髓外(EM)病变,患者为行遗传学筛查需做多次痛苦的骨髓(BM)穿刺,其所获得的标本仍可能缺乏代表性。血浆游离DNA与骨髓浆细胞(PCs)分析结果具有高度一致性,但仅限检测少数频发突变,因全面的基因特征分析技术(如全外显子测序,WES)仅可应用于<25%的样本。相比之下,CTCs几乎在所有患者中均可检测到且影响预后,但对其在多发性骨髓瘤(MM)无创性遗传学特征检测中应用的研究较少。

目的

比较CTCs与相应BM克隆性PCs及EM浆细胞瘤遗传图谱的差异,在38例MM患者遗传性外周血(PB) CTCs和相应BM克隆性PCs中验证CTCs检测、分离的标准化分析技术。8例患者EM浆细胞瘤中的克隆性PCs同时经荧光激活细胞筛选(FACSorted)。PB中T细胞用作胚系对照。在训练集中,研究人员对8例病人相应CTCs、BM及EM浆细胞瘤三组空间分布克隆进行传统WES分析。验证集中,8例应用铬外显子组解决方案比较CTCs和BM克隆性PCs中基因突变、 拷贝数变异(CNA)及易位情况,22例应用CytoScan芯片平台单独检测CNA。

结果

在训练集中,CTCs可检测到BM检测到的193/226(86%)处突变和EM克隆性PCs检测到的231/269(86%)处突变。所有BM或EM克隆性PCs中检测到的MM频发突变均可在CTCs中检测到。值得注意的是,有39处EM浆细胞瘤中检测到的突变可在CTCs中检测到,但BM克隆性PCs中未检测到;有50处突变仅在CTCs中检测到。研究人员在证实CTCs中存在绝大多数BM和EM中的基因突变,且揭示了多种单次BM穿刺未检测到的突变后,评估了利用少量细胞(如CTCs)检测基因突变和/或CNA的标准化分析技术的可靠性。应用10XGenomics平台检测,BM克隆性PCs中表达的250/266(94%)处总突变和所有MM频发突变均可在CTCs中检测到(如KRAS、BRAF、TP53或FAM46C突变)。CTCs中可检测到BM克隆性PCs中101/119(85%)处CNA,2/2(100%)处IgH Tx。应用Cytoscan平台检测,CTCs和BM克隆性PCs中CNA检测在染色体臂和间质水平均100%一致。CTCs可检测全部TP53突变。另外,BM克隆性PCs中存在的+1q、del1p、del17p或t(4;14)变异均可由CTCs检测到,并经FISH证实。

结论

本研究为CTCs用于遗传学特征检测的最大宗数据,并可作为MM患者骨髓内外遗传学图谱的可靠替代检测方式。因NGF技术的广泛应用,CTCs的量化、分离和遗传学特征检测可成为对MM患者进行无创危险分层的最佳标准化方式。

参考文献

Garcés JJ, Bretones G, Burgos L, et al. OAB-84: Circulating Tumor Cells (CTCs) for Comprehensive and Multiregional Non-Invasive Genetic characterization of Multiple Myeloma (MM)

责任编辑:Amiee


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