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【SABCS 2016】Y537S ESR1突变是导致雌激素受体阳性乳腺癌远处转移的主要驱动力

2016年12月21日

编译：peng wei

来源：肿瘤资讯

背景：

在接受内分泌治疗的转移性乳腺癌患者中，雌激素受体 (ESR1)突变是很常见的。我们暂不知道这些突变是否参与了转移。

实验设计和方法：

我们利用 CRISPR Casp-9技术合成了ESR1 Y537S 基因突变。采用compusyn软件评价体外协同作用。进行裸鼠肿瘤异种移植研究。同时进行ChIP-seq（免疫共沉淀）和转录组分析。

结果：

我们通过基因敲除技术合成CRISPR ESR1 y537s 突变基因和使用慢病毒转染入MCF-7细胞。转录组分析显示标志性的通路（包括EMT和雌激素调节基因表达）的表达是明显增高的。在突变细胞株中，EMT从上皮细胞钙粘蛋白（ E-cadherin）结合变成了与波形蛋白（vimentin）结合，还增加了SNAIL和TWIST的表达。突变细胞对他莫昔芬耐药，但是对氟维司琼的治疗有效。我们将观察氟维司琼和依维莫司或palbociclib的协同治疗作用。

实验发现，在裸鼠乳腺脂肪垫上生长的CRISPR Y537S突变敲除后的细胞能够转移到远处器官包括肺、肠道和肾脏。在雌激素的作用下，亲本野生型ER小鼠和CRISPR y537s ER突变的小鼠远处转移发生率无差异。然而，若雌激素缺乏，可见80%的CRISPR y537s突变小鼠转移能力增加，在亲本野生型ER小鼠未见此种情况（p=0.04）。

有趣的是，在裸鼠乳腺脂肪垫上生长的CRISPR Y537S突变敲除后的细胞对他莫昔芬没反应，他莫昔芬能够显著抑制突变肿瘤的生长。远处转移的肿瘤仍可保持ER表达及激素敏感性。使用免疫印迹分析使用他莫昔芬治疗转移性肿瘤与原发性乳腺脂肪垫部位的肿瘤生长，结果发现雌激素调节基因表达的显着减少，但不影响EMT相关标志物的表达，提示EMT与远处转移无关。

我们发现，基因EMT也被认为是一个直接结合位点，与使用ChIPseq技术的野生型细胞相比，主要作用在y537s突变细胞。我们发现，y537s突变的表达为很明显的，驱动远处转移瘤的生长。通过METABRIC数据库，我们发现 Y537S ER突变基因的特异性表达预示着ER+的患者更短的DFS，通过Memorial Sloan Kettering数据库，发现更差的肺特异性无转移生存。

结论：

Y537S ER突变是ER+的乳腺癌细胞株远处转移的主要驱动力。虽然他莫昔芬在减少在原发部位生长的突变细胞的生长是无效的，但是在减少远处转移时是有效的。 Y537S ER突变基因的特异性表达预示着更短的DFS和ER+的患者出现远处转移率。基因突变可以认为是正在接受激素治疗的转移性乳腺癌患者继续使用激素维持治疗一种新的预测因子。

2020年10月29日

陈志敏

徐州市中心医院 | 肿瘤内科

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