首页 > 文章详情

WCLC22｜曲美替尼通过 ID1 下调抑制 MEK1 2 上调 KRAS 突变型 NSCLC 中 PD-L1 的表达

2022年08月05日

编译：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

世界肺癌大会（WCLC）是世界上最大的肺癌及胸部肿瘤会议，2022 WCLC将于8月6~9日在奥地利维也纳召开，逾100个国家的学者将进行300+场次口头报告与1000+海报展示。

7月13日WCLC官网公布了部分摘要，一项研究显示在 KRAS 突变 NSCLC 细胞系中，曲美替尼治疗后 Id1 阻断诱导的 PD-L1 上调可作为一种新的治疗策略，使 NSCLC 对抗 PD-1/PD-L1 免疫治疗敏感。

介绍

抗 PD-1/PD-L1 免疫疗法显着提高了非小细胞肺癌患者的生存率。然而，这些治疗的疗效高度依赖于肿瘤的高PD-L1表达。我们之前报道了 Id1 在 KRAS 突变型非小细胞肺癌中的作用、以及联合阻断 PD-1 和 Id1作为一种新的治疗方法、在 KRAS 突变型非小细胞肺癌小鼠模型中的疗效（Baraibar，Cancers 2020）。曲美替尼抑制是一种口服 MEK1/2 抑制剂，作用于 KRAS 下游。曲美替尼已获得 FDA 批准、用于 BRAF V600E突变型转移性黑色素瘤患者和非小细胞肺癌患者的治疗。本研究中，我们旨在评估曲美替尼阻断Id1 表达并通过 PD-L1 过表达来增强抗 PD-1/PD-L1疗效的效果。

方法

为了证明抑制 MEK1/2 会降低 Id1 表达，使用了人 KRAS 突变（包括H1792、H2009、H2122、H358、HCC44)、KRAS 野生型细胞系(H1568, H1993)，以及KRAS 突变型鼠细胞系 (LLC、KLA、CMT-167)。所有细胞系接受了不同浓度 (10 nM-500 nM) 和不同治疗时间 (24H-72H) 的曲美替尼治疗。我们使用了qPCR和蛋白质印迹测量方法来检测Id1的表达。针对 Id1 的特异性 shRNA 用于比较 Id1 沉默的肿瘤细胞以及曲美替尼治疗的肿瘤细胞。使用Id1 野生型或 Id1 沉默型LLC 细胞，在C57BL6J和 PBS 或每日曲美替尼 0.5 mg/Kg处理的 Id1 缺陷型小鼠使用 LLC 细胞（Id1野生型或 Id1 沉默）生成同基因皮下肿瘤。曲美替尼和IFN-γ暴露后，通过流式细胞术测定 Id1 沉默和野生型细胞中 PD-L1 的表达。为了证明 MEK1/2 抑制后 PD-L1 表达的增加依赖于 Id1 抑制，我们建立了 Id1 过表达细胞和曲美替尼耐药细胞系。

结果

曲美替尼处理的人和小鼠NSCLC细胞系的体外实验表明，MEK1/2 抑制能显著降低 KRAS 突变型和 KRAS 野生型NSCLC细胞系中的 Id1 表达。曲美替尼和 Id1 沉默细胞处理的细胞之间的比较显示，鼠细胞系中降低 EMT 标志物和 FOSL1 通路的作用相同。在 C57BL6J 和 Id1 缺陷小鼠中进行的体内实验显示，Id1基因敲除小鼠与接受曲美替尼治疗的 Id1 野生型小鼠之间的肿瘤生长没有显着差异。这些肿瘤样本的 IHC 分析显示 Id1 水平降低。由于 Id1 在 PD-L1 调节中起关键作用，我们检测了用曲美替尼处理的H1792、H2009、H2030、H358、LLC、KLA、CMT-167 细胞系中的 PD-L1 表达。流式细胞分析显示，MEK1/2 抑制剂能显著增加肿瘤细胞表面的PD-L1 表达、并与Id1 抑制相关。为了验证通过 MEK1/2 抑制的 PD-L1 上调是依赖于 Id1 下调的，我们构建了了 Id1 过表达的细胞系和曲美替尼耐药型细胞系。流式细胞分析显示，Id1过表达的细胞对 MEK1/2 抑制没有应答，其PD-L1 表达不变，而曲美替尼耐药型细胞系持续表达 PD-L1、并没有表现出 Id1 抑制。我们也将汇报曲美替尼联合抗PD-1在体内模型中的最终疗效数据。

结论

通过曲美替尼在体外和体内显著降低 Id1 表达，复制针对 Id1 的特异性shRNA，对 MEK1/2 进行药理学抑制。在 KRAS 突变 NSCLC 细胞系中，曲美替尼治疗后 Id1 阻断诱导的 PD-L1 上调可作为一种新的治疗策略，使 NSCLC 对抗 PD-1/PD-L1 免疫治疗敏感。

责任编辑：肿瘤资讯-Shire
排版编辑：肿瘤资讯-Kate