首页 > 文章详情

检测ER，PR，Ki67和HER2表达，RT-qPCR可以替代免疫组化吗？

07月12日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

关于多基因检测和免疫组化（IHC）检测一致性的数据十分有限。MammaTyper是一种体外诊断定量实时聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测，用于评估ESR1，PGR，ERBB2和MK167的mRNA表达。近日发表一项研究，对比了RT-qPCR和IHC检测乳腺癌标志物的一致性^[1]。【肿瘤资讯】特此整理研究的主要内容，以飨读者。

研究背景

目前评估乳腺癌ER、PR、HER2和Ki67表达的金标准是IHC，这是一种半定量方法。IHC的限制包括病理医师间和医师内变异，特别是对于Ki67的评估。目前HER2状态使用IHC和原位杂交（ISH）判断，如荧光原位杂交（FISH），而mRNA为基础的检测可能可克服IHC和FISH的部分局限性。

MammaTyper是体外检测ESR1，PGR，ERBB2和MK167表达的RT-qPCR方法。国际多中心前瞻性验证试验证实MammaTyper的定量检测具有高度准确性和可复制性。有研究显示MammaTyper检测的高PGR表达表现优于IHC检测。但是尚无MammaTyper和IHC的直接比较。因此，当前研究对比了二者检测ER、PR、HER2和Ki67的表现。

研究方法

使用粗针活检甲醛固定石蜡包埋（FFPE）乳腺癌标本。按照标准流程进行ER、PR、HER2和Ki67的IHC染色。对标本进行RNA提取，按标准流程进行RT-PCR检测，将两种检测方法进行比较和统计学分析。

研究结果

临床病理学特征

共纳入131例乳腺癌粗针活检标本。患者中位年龄61岁，60.3%的肿瘤为2级。所有标本行MammaTyper检测，1例含有实性乳头状癌成分的肿瘤未行IHC染色。

ER，PR和HER2检测一致性

结果显示所有检测方法的总一致性百分比（OPA）均在90%以上：ER为94.7%，PR为90.1%，HER2为95.0%（表1）。

表1 ER/ESR1，PR/PGR，HER2/ERBB2 IHC和MammaTyper检测一致性

ESR1的IHC和RT-qPCR检测的OPA为94.7%，显示出近乎完美的一致性（表1）。ER IHC和ESR1的线性回归系统（R2）分别是0.933和0.871，P＜0.001（图1A）。当ER为阴性时，ESR1的RT-qPCR具有高度一致率和高阳性率（超过10%）。

研究不一致病例，发现2例标本含有少量浸润性肿瘤组织，被MammaTyper分为ER低阳性；3例标本显示ER弱核染色，被MammaTyper分为ER阴性。

图1 ER，PR，HER2和Ki67表达IHC和RT-qPCR对比

PR一致率

使用3种界值（1%，10%和20%），PR/PGR的OPA超过90%（表1）。PR IHC和PGR的线性回顾系数分别是0.864和0.746，P＜0.001（图1B）。

HER2一致率

OPA为95.0%（表1），具有高度异质性（0.759）。13/126例（10.3%）肿瘤为IHC/FISH评估HER2阳性，而15/126（11.9%）被MammaTyper分类为HER2阳性（图1C）。

HER2低表达乳腺癌

HER2低表达定义为IHC 1+或2+，FISH阴性。在113例HER2 IHC阴性肿瘤中，72例（63.7%）为HER2 0，41例（36.3%）为HER2低表达。后者MammaTyper检测包括35例HER2低表达，3例HER2阴性，和3例阳性。72例IHC HER2 0的肿瘤被MammaTyper分为40例HER2低表达，31例HER2 0，1例阳性。因此，40/72例IHC HER2 0肿瘤被MammaTyper分为ERBB低表达。ERBB2表达在IHC HER2低表达组显著高于IHC HER2 0组（P＜0.001）（图2）。

图2 HER2低表达分析

ER/PR/HER2 IHC和MammaTyper分布

ER和PR IHC显示出2个峰值：最高为强阳性表达，第二为阴性（0）染色。但是mRNA显示出表达的更宽动力范围。同样，标准HER2 IHC评分（0，1+，2+和3+）和更宽的mRNA水平范围对应，提示IHC评分0，1+和2+可进一步使用MammaTyper分析分类。

Ki67表达一致性

IHC和MammaTyper的线性回顾系数为0.836（图2F）。当Ki67界值设为5%时，两种方法具有最高一致率（OPA 95.7%）。

研究讨论

这项前瞻性研究显示ERBB2，ESR1和PGR进行RT-qPCR为基础的mRNA表达分析和IHC具有高度一致性。

ER，PR，HER2和Ki67的检测金标准为IHC。但是IHC技术为半定量，需要主观评估，并高度依赖于病理医师的技巧和经验。特别是Ki67的评估极具挑战性，其具有多种界值，限制了临床实践中的应用。而研究显示这些标志物的mRNA和蛋白水平具有高度一致性，一致性高于既往研究报道。一项亚洲研究报道397例乳腺癌患者的ER一致率为81.6%，PR一致率为87.2%，HER2一致率为79.1%^[2]。而当前研究显示两种方法具有良好一致率。

研究优势在于在中心三级专科医院进行了组织学评估和分子检测。研究为前瞻性，纳入所有乳腺癌分子亚型。且分析全面，包括了HER2低表达类型。研究提示MammaTyper是一种IHC的可信、高效且可复制的替代检测方法。有必要开展研究行进一步验证，为临床分子标志物检测增加更多选择。

参考文献

[1] Badr NM, et al. Concordance between ER, PR, Ki67, and HER2-low expression in breast cancer by MammaTyper RT-qPCR and immunohistochemistry: implications for the practising pathologist. Histopathology. 2024 Apr 23.
[2] Chen CJ, et al. Correlation of ER, PR, and HER2 at the protein and mRNA levels in Asian patients with operable breast cancer. Biosci Rep. 2022;42(1):BSR20211706.

声明：材料由阿斯利康支持，仅供医疗卫生专业人士参考

审批号：CN-138419

责任编辑：肿瘤资讯-小编
排版编辑：肿瘤资讯-Niko

07月26日

白文秀

平遥兴康医院 | 中医科

感谢分享受益匪浅

07月25日

高阳阳

河北医科大学第四医院（河北省肿瘤医院） | 放疗科

路过学习学习，谢谢分享

07月25日

尚瑞国

鹤壁市人民医院 | 肿瘤内科

可以预见，恶性肿瘤越来越多的靶点被发现。治疗精准化。