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再放e彩|2022 ASTRO:肿瘤电场治疗(TTFields)可调节巨噬细胞向促炎表型转变

2022年11月21日
整理:肿瘤资讯
来源:肿瘤资讯

               
伍军

中南大学湘雅医院

医学博士 神经外科副主任医师
硕士研究生导师, 留美访问学者
中国解剖学会神经外科分会常务委员
中国临床肿瘤学会(CSCO)神经系统肿瘤专家委员会委员
欧美同学会医师协会神经肿瘤分会委员
中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会胶质瘤学组委员
中国医师协会脑胶质瘤专业委员会药物与免疫治疗学组委员
中南六省(区)胶质瘤联盟委员会委员
湖南省抗癌协会神经肿瘤专业委员会委员

研究目的

本研究旨在评估TTFields调节巨噬细胞表型偏移的潜力。

研究的材料与方法

细胞的提取与处理:从5-8周龄Balb/C小鼠的股骨和胫骨中冲洗收集骨髓细胞,生成骨髓源性巨噬细胞(BMDMs),并在GM-CS/F中分化7天;用LPS+IFN-y(M1极化)或IL-4(M2极化)刺激BMDMs 24h;后续再使用TTFields(1.75 V/cm RMS,150kHz)处理细胞24h。

使用流式细胞术评估F4/80(泛巨噬细胞)和活化标志物MHC II、MHC、CD80、INOS、CD206和Arg1的表达。使用Viobility 405/452 Fixable Dye固定染料鉴别标记死亡细胞;

多重分泌试验用于评估刺激巨噬细胞的异质性。捕获了13种不同蛋白的分泌,包括CXCL1(KC)、IL-18、IL-23、IL-12p70、IL6、TNF-a、IL-12p40、游离活性TGF-B1、CCL22(MDC)、IL-10、IL-6、G-CSF、CCL17(TARC) 和IL-1ß。细胞因子分泌水平进行标准化用于实验组进行对照。

利用Western blot研究TTFields影响巨噬细胞的机制。从处理15、30或 60min的细胞中制备裂解物。使用适当的抗体测定总的和磷酸化的GEF-H1、c-Jun和p65。相对于GAPDH定量条带强度。

研究结果

1. TTFields使M2巨噬细胞极化为促炎性M1表型,并升高M1巨噬细胞的促炎性,表现为CD80和MHC-Il表达增加(图1)。

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图1

2. TTFields减少了M1和M2巨噬细胞中M2表型标记物CD206和ARG-1的表达,但不影响M1表型标记物iNOS的表达(图2)。

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图2

3. TTFields促进M2巨噬细胞分泌CXCL1,并增强预先存在的M1炎症表型(图3)。

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图3

4. TTFields诱导的GEF-H1活化驱动巨噬细胞转录反应程序,以转录因子c-Jun和p65为主(图4)。

4.png

图4

研究结论

TTFields在BMDMs中的应用:①提高M1极化BMDMs的促炎表型;②M2极化BMDMs诱导表型向M1表型偏移;

结果阐明了TTFields对巨噬细胞极化的一种新型免疫调节作用;

GEF-H1/RhoA/ROCK通路的激活似乎与TTFields治疗的巨噬细胞的表型偏移有关。

审批号:ZMCNNP20221117005
有效期一年,过期资料,视同作废
过期时间:2023/11/17

责任编辑:肿瘤资讯-Hedy
排版编辑:肿瘤资讯-CYX

                   

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评论
2022年11月21日
欧阳波
酒钢医院 | 呼吸内科
内容很精彩!值得学习!
2022年11月21日
华仁强
宣恩县长潭河侗族乡中心卫生院 | 肿瘤科
TTFields对巨噬细胞极化的一种新型免疫调节作用;
2022年11月21日
崔艳东
叶县人民医院 | 肿瘤科
肿瘤电场治疗(TTFields)可调节巨噬细胞向促炎表型转变