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【2022ASH·中国之声】【2022ASH·中国之声】山东省立医院：BRD9通过重塑CLL中的染色质可及性促进致癌Nrf2通路并抑制对维奈克拉的敏感性

2022年12月07日

编译：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

一年一度的美国血液学会（ASH）年会是全球血液学领域规模最大、涵盖最全面的国际学术盛会之一。2022年12月10~13日，第64届ASH年会即将在路易斯安那州南部的港口城市新奥尔良以线上结合线下的形式召开。本次会议将汇集世界各地的血液病学专家，并将公布众多的临床及科研成果，这其中也包含了来自中国血液学领域的最强音。山东省立医院研究团队的一项题为“BRD9 Facilitates Oncogenic Nrf2 Pathway and Dampens Venetoclax Sensitivity By Remodeling Chromatin Accessibility in Chronic Lymphocytic Leukemia”的研究报告入选本次大会的Oral abstract session。【血液肿瘤资讯】现特此整理，与您抢先共享ASH会议上的中国好声音！

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【ORAL146】BRD9通过重塑CLL中的染色质可及性促进致癌Nrf2通路并抑制对维奈克拉的敏感性

研究内容简介

含溴结构域蛋白9（BRD9）作为染色质重塑复合物的关键成分在基因转录的调节中发挥作用，广泛涉及致瘤性。尽管维奈克拉已经改变了慢性淋巴细胞白血病（CLL）的治疗模式，但仍有部分患者无法达到或维持临床缓解，这表明临床上仍需要新型的治疗靶点或联合治疗方案。因此，本研究旨在探索BRD9在CLL中的调节机制和潜在临床效用。

首先，在mRNA和蛋白水平上，与健康供体（n=17）相比，CLL患者（n=94）中经常观察到 BRD9表达异常升高（供体vs. CLL患者，0.94±0.41 vs. 10.96±2.01，P=0.03）。此外，BRD9过表达被确定为CLL的独立预后因素（HR=3.55，P<0.001）。BRD9的异常上调与CLL患者的不良预后密切相关，包括总生存期（HR=3.246，P=0.02）和至首次治疗时间（HR=2.326，P=0.005）。

为研究BRD9在CLL中的功能意义，使用慢病毒shRNAs建立了稳定的BRD9敲除细胞。BRD9 的抑制显著阻碍了CLL的细胞增殖，增加了细胞凋亡，诱导G1/S期阻滞。此外，BRD9的选择性抑制剂I-BRD9以时间和剂量依赖的方式导致CLL原代细胞增殖缺陷。研究者随后在原位CLL异种移植小鼠模型中进行了I-BRD9的临床前研究。值得注意的是，I-BRD9治疗显示出明显降低的白血病负荷，并表现出比对照组更小程度的脾肿大（图1A），这通过脾脏的H&E和Ki67染色得到了进一步证实。此外，I-BRD9可以显著延长CLL异种移植小鼠的寿命（P=0.02）和延缓疾病进展（P<0.01）。并且，使用流式细胞术证实了用I-BRD9处理的小鼠骨髓和脾脏中CLL细胞的减少。

为了解释BRD9在CLL发病机制中的具体作用，研究者使用ATAC-seq和CHIP-seq来监测BRD9缺陷和对照细胞。敲除BRD9可减弱转录起始位点附近的整体ChIP信号和染色质可及性。综合分析RNA-seq的mRNA表达谱和CHIP-seq的差异信号，选择Nrf2作为进一步研究的候选靶点。在BRD9沉默的CLL细胞中，Nrf2和下游靶点（如HO-1、NOQ1和SOD1）的表达显著下降（P<0.01）。此外，通过构建截断，在NFE2L2（编码Nrf2）启动子上游的2kb区域发现了BRD9结合位点的存在（P<0.05）。此外，通过CHIP-qPCR进一步证实了结合位点H3K27ac修饰的富集（P<0.01）。而组蛋白乙酰转移酶抑制剂减少了BRD9在该区域的富集，表明BRD9通过识别乙酰化的组蛋白标记与NFE2L2结合。此外，Hi-C数据表明标记区域转录因子复合物的循环，显示了shControl和shBRD9之间的CHIP信号不同（图1B）。

图1

从RNA-seq获得的差异表达基因的GO分析显示了凋亡途径的主要富集，这促使研究者进一步研究 BRD9在维奈克拉敏感性中的作用。加入维奈克拉后，BRD9沉默的CLL细胞的活力显著低于对照细胞，表明BRD9抑制可能驱动维奈克拉的治疗漏洞（therapeutic vulnerability）（P<0.05）。此外，与单药相比，用维奈克拉联合I-BRD9可显著减轻CLL原代细胞的恶性增殖并增强其凋亡（所有联合指数均< 0.6，P<0.05）。Western blotting检测提示Nrf2/ARE信号参与BRD9抑制诱导的维奈克拉敏感性。

研究结论：

本研究首次证明了BRD9在CLL发生中的致癌作用，表明维奈克拉联合I-BRD9治疗在临床应用中具有治疗协同作用。在CLL患者广泛使用维奈克拉的背景下，靶向BRD9显示出一定的临床应用前景。

参考文献

Xinting Hu, Ya Zhang, Hua Wang, et al;BRD9 Facilitates Oncogenic Nrf2 Pathway and Dampens Venetoclax Sensitivity By Remodeling Chromatin Accessibility in Chronic Lymphocytic Leukemia; https://ash.confex.com/ash/2022/webprogram/Paper163284.html.

责任编辑：Luna
排版编辑：Luna