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【ASCO 2021】清热祛痰方对食道癌细胞恶性表型及增殖信号通路的影响

2021年06月07日

受新冠疫情影响，2021年美国临床肿瘤学会年会（ASCO）年会于6月4~8日以线上会议的形式召开。其中来自河南中医药大学的Effects of formula composed of active monomers of removing heat and phlegm prescription on malignant phenotypes and growth signaling in esophageal carcinoma cells入选，该研究表明从清热祛痰方中提取的4种活性单体及其组合而成的新型RHPP方剂能抑制EC9706、Eca109、TE-1、EC-1这4种食道细胞的增殖迁徙等能力，且这一作用和EGFR、PLC-γ1、pkc α蛋白表达相关。

目的

食管癌在全球恶性肿瘤发病率中排名第七，死亡率高居第六。清热祛痰方（RHPP）是从531种中药中筛选出来对食道癌具有一定疗效的方剂。本研究拟分离、提纯并鉴定RHPP方剂中的活性单体化合物，并检测这些单体化合物对Eca109、EC9706、EC-1、TE-1四种食道癌细胞系生物学功能的影响和潜在机制，并在此基础上将这些单体化合物优化组合并研究其作用机制。

方法

采用乙醇萃取法、色谱分析法、重结晶法、高效液相色谱法、光谱法等方法对RHPP的活性单体化合物进行提取、分离和鉴定。并检测活性单体化合物及其组合对Eca109、EC9706、EC-1、TE-1四种食道癌细胞系的增殖（MTT法），迁徙（RTCA试验），克隆形成（软琼脂集落法）能力，以及细胞周期和信号通路蛋白表达的影响。

结果

从穿山龙(CSL)、皂角(ZJ)、土贝母(TBM)、重楼(CL)中分别鉴定出4个分子量分别为868Da、1003Da、1365Da、854.5Da的活性单体，其分子式依次为C45H72O16、C50H82O20、C64H100O31和C44H70O16。4种活性单体均能显著影响不同食道癌细胞的形态以及增殖、迁移、克隆形成能力和细胞周期。穿山龙、皂角、土贝母和重楼的活性单体对Eca109细胞系的的IC50值分别1.29±0.12μg/ml、2.42±0.09μg/ml、1.93±0.09μg/ml、3.04±0.28μg/ml；对EC9706细胞系的IC50值分别为1.41±0.02μg/ml、5.94±0.45、1μg/ml.97±0.09μg/ml、0.63±0.04μg/ml；对TE-1细胞系的IC50值分别为3.72±0.28μg/ml、35.58±0.58μg/ml、7.90±0.41μg/ml、1.85±0.09μg/ml；对EC-1细胞系的IC50值分别为1.11±0.14μg/ml、3.56±0.28μg/ml、1.23±0.02μg/ml、0.61±0.02μg/ml。4种单体化合物均可下调食道癌细胞EGFR、PLC-γ1和PKCα蛋白的表达。根据相较于基线值增减比例优化组合出的新的清热（RH）方、祛痰（RP）方和清热祛痰（RHPP）方，三种方剂中活性化合物的配比为mCSL：mCL= 6：4，mZJ： mTBM=3：7，mCSL：mCL：mZJ：mTBM=48：32：6：14。RH方、RP方和RHPP方均能抑制4种食道癌细胞的增殖、迁移、克隆形成能力和细胞周期。

结论

4种活性单体化合物及其组合而成的新型RHPP方剂均能抑制EC9706、Eca109、TE-1、EC-1这4种食道细胞的增殖，且这一作用和EGFR、PLC-γ1、pkc α蛋白的表达密切相关。

参考文献

Fuchun Si, Wenbin Wang;Effects of formula composed of active monomers of removing heat and phlegm prescription on malignant phenotypes and growth signaling in esophageal carcinoma cells.2021 ASCO abstr e16051.

责任编辑：Edita
排版编辑：Edita

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