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张蕾教授：双重靶向 ROR1 和 BTK，为MCL治疗开辟新思路

05月27日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

套细胞淋巴瘤（MCL）是一种兼具惰性淋巴瘤不可治愈性和侵袭性淋巴瘤侵袭性的非霍奇金淋巴瘤亚型，目前治疗方法有限，患者生存率较低，预后差。研究人员发现，在各种类型的肿瘤中，尤其是在肿瘤干细胞/肿瘤起始细胞中，ROR1 可重新表达，且 ROR1 以 BCR/BTK 非依赖性方式持续激活致癌信号通路。因此，研究者推测双重靶向 ROR1 和 BTK 可能会增强抗淋巴瘤的疗效，克服耐药性并有效杀伤复发/难治性 MCL 细胞。近日，该研究结果发表在Blood杂志上。本文特邀郑州大学第一附属医院张蕾教授针对该研究进行点评，详情如下。

研究介绍

研究背景

套细胞淋巴瘤（MCL）是一种罕见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤亚型。BTK抑制剂（BTKis）和CAR-T细胞的开发及应用彻底改变了MCL患者的治疗模式。然而，这种侵袭性 B 细胞淋巴瘤经常复发，导致患者生存率很低，预后差。因此，迫切需要新型的治疗方法来克服耐药性。

ROR1在胚胎发育过程中正常表达，但在成人组织中通常不表达或低水平表达。研究人员在各种类型的癌症中尤其是在肿瘤干细胞/肿瘤起始细胞中，发现了 ROR1 的重新表达。ROR1 以 BCR/BTK 非依赖性方式持续激活致癌信号通路。因此，研究者推测双重靶向ROR1 和 BTK可能会增强抗淋巴瘤的疗效，联合使用靶向 ROR1 的单克隆抗体 zilovertamab（cirmtuzumab）和 BTK抑制剂有可能克服耐药性，并有效杀死 MCL 细胞。

研究方法

本研究使用了一组 MCL 细胞系和原发MCL患者样本。通过流式细胞术和 Western 印迹法测定 MCL 细胞系和原代 MCL 样本中 ROR1 的表达水平。为了建立患者来源的类器官（PDO），将患者样本或异种移植（PDX）肿瘤中的MCL细胞重悬于含有细胞因子混合物的培养基中。根据需要将 50% 基质胶中的细胞聚合体转移至多孔板中。建立的 PDOs 用于药物敏感性测定。此外，还使用患者来源的PDX小鼠模型来评估 BTKis 和zilovertamab（Zilo）的单药和联合药效。使用 CellTiter 常规或3D细胞活力检测试剂盒（Promega）进行细胞活力测定。

研究结果

研究人员假设，双重靶向BTK 和 ROR1 信号通路将增强对MCL的细胞毒作用，其中包括主要的增殖细胞群和次要ROR1 +CD117 + 细胞群，其存活不依赖于 BTK。为了验证这一假设，研究人员首先使用流式细胞术和免疫印迹分析法分析了 ROR1 在 MCL 细胞系、原代和 PDX MCL 细胞中的表达情况。

结果表明，与正常 PBMC 相比，所有被检测的 MCL 细胞系（包括 JeKo-1、Mino、Z-138、Granta519、JVM2、SP49、Maver-1 和 Rec-1）中都检测到了 ROR1 的表达。为了检测 p53 状态是否与 MCL 细胞对 BTKi 和 Zilo 的敏感性有关，研究人员检测了 BTKi 和 Zilo 联合应用对MCL 细胞系的细胞毒作用：（1）TP53突变型（TP53 Mut）的细胞系： JeKo-1、JeKo-R、Mino和Mino-R；（2）野生型TP53（TP53 WT）的细胞系： Z-138和Maver-1，以及从携带TP53 WT或TP53 Mut来源的PDO和PDX中分离出的细胞。用2-10 µM的单药BTKi（伊布替尼、泽布替尼、阿可替尼或pirtobrutinib）处理TP53突变MCL细胞，可显著诱导细胞毒作用，当BTKi与25～50 µg/ml Zilo联用时，细胞死亡明显增加。相反，在TP53 WT的MCL细胞系中，与单药相比，BTKi与Zilo联合用药并没有显著增强细胞毒作用。这些结果表明，TP53 的遗传学状态是影响 BTKi与Zilo 联合用药对 MCL细胞毒作用的重要因素。为了进一步评估 BTKi-Zilo联合应用的增效作用，研究者使用 PDO 平台进行了体外细胞存活率检测。通常情况下，PDO 采用单药或联合治疗方案。与 MCL 细胞系中的数据一致，BTKi与Zilo联合用药在来自伴 TP53 突变的初治患者和复发患者的 PDO 模型中细胞毒作用增强。此外，BTKi与Zilo联合用药在源自携带 TP53 突变MCL患者的 PDX 模型中显示出协同效应。

研究结论

双重靶向BTK 和 ROR1 信号通路可选择性地在伴TP53 突变 MCL 临床前模型中增强疗效。这些数据为制定精准治疗策略提供了理论依据，有望改善TP53突变MCL患者的预后。

大咖点评

张蕾

博士、博士后、主任医师、教授、硕士生导师

郑州大学第一附属医院肿瘤科副主任，淋巴瘤病区主任
河南省淋巴瘤诊疗中心副主任
中国女医师协会临床血液淋巴专业委员会常委
中国老年肿瘤学会淋巴血液分会委员
中国抗癌协会血液病转化医学专业委员会委员
河南省研究型医院学会淋巴瘤专业委员会主任委员
河南省医师协会肿瘤医师分会副会长
河南省抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会副主委
河南省医学会肿瘤医学专科学会淋巴瘤学组副组长
中国肿瘤防治联盟淋巴瘤专业委员会常务委员
河南省抗癌协会老年肿瘤专业委员会常务委员

张蕾教授：套细胞淋巴瘤（MCL）是一种兼具惰性淋巴瘤不可治愈性和侵袭性淋巴瘤侵袭性的B 细胞淋巴瘤，复发率高，预后差，尤其是短期内复发的患者，目前的治疗方法如 BTK 抑制剂和 CAR-T 细胞疗法虽有一定效果，但仍有未被满足的临床需求。

受体酪氨酸激酶样孤儿素受体1 (Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1，ROR1)是ROR受体家族的一员，可通过介导非经典Wnt信号通路（non-canonical Wnt pathways）的信号传递，在多种生理过程中发挥重要作用，其中包括调节细胞分裂、增殖、迁移和细胞趋化。在儿童和成人阶段，ROR1在正常组织中表达量很低或几乎不表达，但在多种实体瘤和血液肿瘤中却存在差异化的高度表达，如ROR1表达是影响CLL患者预后的重要因素。多项研究表明ROR1在其他血液学恶性肿瘤如MCL、弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、滤泡性淋巴瘤（FL）和边缘区淋巴瘤（MZL）中表达异常。该特性使ROR1成为肿瘤治疗的理想靶标，并且目前已经有多种靶向ROR1的药物处于临床研究阶段。

此次研究中，研究者提出了双重靶向 ROR1 和 BTK的联合治疗，有望会增强抗淋巴瘤疗效的假设。结果显示 ROR1 在 MCL 细胞中的表达水平较高，特别是在肿瘤干细胞/肿瘤起始细胞中，这为靶向 ROR1 提供了理论依据。此外，联合使用靶向 ROR1 的单克隆抗体和 BTKis 显示出了克服耐药性和增强抗淋巴瘤疗效的潜力，这是一个令人鼓舞的发现。

该研究使用了多种方法，包括 MCL 细胞系、原代患者样本、PDO 模型和 PDX 小鼠模型，综合评估了药物的效果。这种多层次的研究设计增加了结果的可靠性和说服力。另外，研究者不仅检测了细胞的活力，还探讨了TP53 状态与药物敏感性的关系，为个体化治疗提供了参考。然而，由于该研究是在临床前模型中开展，还需要进一步的临床试验来验证这些发现并评估其在患者中的安全性和有效性。

综上所述，这项研究为MCL的治疗提供了新的思路和潜在的治疗策略。然而，需要注意的是，临床前研究结果并不一定能直接转化为临床实践，还需要更多的研究来验证其在患者中的应用价值。希望未来的研究能够继续深入探索这一领域，为改善MCL患者的预后提供更多有效的治疗选择。

参考文献

Nie L, Jiang V C, Liu Y, et al. Dual Targeting of ROR1 and BTK Augments the Anti-Lymphoma Activity in Mantle Cell Lymphoma[J]. Blood, 2023, 142: 4366.

责任编辑：Amiee
排版编辑：guangli