溶瘤病毒（oncolytic virus，OVs）是一种新型肿瘤免疫疗法，其通过不同的调控机制在肿瘤细胞内复制、裂解肿瘤细胞，而不影响正常细胞生长。
2023年1月19日~21日，消化道肿瘤领域的国际顶级学术盛会——美国临床肿瘤学会胃肠道肿瘤研讨会（ASCO GI）以线上与线下相结合的形式在美国旧金山召开。作为美国最具盛名和影响力的消化道肿瘤会议，多项重磅研究于会议期间公布。
值此国际盛会召开之时，【研值圈】特别整理溶瘤病毒相关的重要研究进展，以飨读者。
溶瘤病毒CF33是一种嵌合痘苗病毒，它通过重组来自多个痘病毒株的有利基因序列产生一种新的、更安全和更有效的病毒。大量的临床前数据表明CF33具有肿瘤靶向性、自我放大能力、并且副作用最小，对原发性和转移性肿瘤以及复发性肿瘤均有效，与标准护理疗法和新兴新疗法协同作用，刺激免疫系统认识肿瘤。
世界知名的癌症、糖尿病和其他危及生命疾病的研究和治疗组织——希望之城开发的CF33-hNIS-antiPDL1 疗法，是由一种天然病毒（嵌合溶瘤正痘病毒）基因改造而成。Imugene 有限公司已被授权拥有涵盖 CF33-hNIS-antiPDL1 的专利。这是一家开发免疫疗法的公司，旨在激活癌症患者的免疫系统以治疗和根除肿瘤。CF33-hNIS-antiPDL1被设计用于感染、复制和杀死癌细胞，同时保护健康细胞。
开发新型嵌合体细胞病毒平台CF33及其衍生物，用于胃癌腹膜癌转移的腹膜定向CF33-OV治疗
研究背景
腹膜转移癌（PC）是胃癌（GC）致命的晚期表现。
CF33，一种嵌合型溶瘤病毒，其基因修饰的衍生物对各种实体瘤显示出独特的癌症选择性和溶瘤效力。静脉注射和瘤内注射CF33-hNIS和CF33-hNIS-antiPDL1已经进入Ⅰ期临床试验，以治疗三阴性乳腺癌和不可切除的实体瘤。本研究旨在探索CF33-OV对GCPC的抗肿瘤活性。
研究方法
研究人员用CF33、CF33-GFP或CF33-hNIS-antiPDL1以不同的倍数（MOI 0.01、0.1、1.0和10.0）感染六种胃癌细胞系，包括肠型（AGS和MKN-74）和扩散型（KATO Ⅲ、MKN-45、SNU-1和SNU-16），通过标准噬斑试验和细胞增殖试验检测病毒增殖和细胞毒性。研究人员还进行了免疫荧光成像和流式细胞分析，以验证病毒编码的基因表达和病毒编码的抗PD-L1单链抗体对PD-L1结合的阻断。建立了SNU-16-ffluc细胞腹膜播散异种移植的小鼠模型，以评估腹膜内（IP）CF33-hNIS-antiPDL1治疗（3×105 pfu×3 doses）的抗肿瘤活性。
研究结果
CF33-OV对人胃癌细胞系表现出剂量依赖性的感染、复制和杀伤作用。免疫荧光成像显示病毒编码的GFP、hNIS和抗PD-L1 scFv在CF33-OV感染的GC细胞中表达。GC细胞表面PD-L1结合被病毒编码的抗PD-L1 scFv阻断。在异种移植模型中，腹腔注射CF33-hNIS-antiPDL1治疗显著减少了腹膜肿瘤（P<0.0001），减少了腹水量(62.5% PBS vs 25% CF33-hNIS-antiPLD1)，并延长动物的生存期（P<0.01）。
结论
CF33-OV具有有效的抗肿瘤活性，并能在体内外传递功能蛋白。CF33-hNIS-antiPDL1治疗诱导GCPC的持续消退并延长了生存期。这些有希望的临床前结果支持在GCPC患者中使用CF33-hNIS-antiPDL1的腹膜导向策略。
CF33-hNIS-antiPDL1对有腹膜转移和无腹膜转移的胃癌患者的新鲜腹膜细胞的体外溶瘤和免疫活性
研究介绍
对于GC的腹膜转移（PM）目前仍无有效的治疗方法，在确诊后几个月内仍然是致命的。本研究探索了一种新的嵌合溶瘤病毒平台CF33-OV对GC患者腹膜癌细胞的抗癌潜力。
研究方法
研究人员前瞻性地收集了2019~2020年间30例胃癌患者的新鲜腹水或腹腔冲洗液。其中包括16例男性患者（53.3%）和14例女性患者（46.7%），平均年龄为51.3±15.1岁。
在30例患者中，23例（90%）有细胞学或活检证实的PM。使用流式细胞仪分析从腹膜液中分离的细胞的免疫细胞标记物，和/或用PBS、CF33-GFP（MOI=3）或CF33-hNIS-antiPDL1（MOI =3）处理15小时。研究人员评估了经处理的细胞的病毒感染、复制、CD8+和CD4+表达与衰竭标记、病毒感染、复制和细胞毒性。体外评估了病毒编码的抗PD-L1 scFv对CD274 (PD-L1)的阻断，以及CF33-hNIS-antiPDL1治疗后生长因子和细胞因子的释放。
研究结果
腹水组CD45-癌细胞百分比高于腹腔冲洗组，而CD8+ T细胞百分比明显低于腹腔冲洗组。在基线时，在癌细胞表面发现了低水平的CD274（PD-L1）、CD252（OX40L）和EGFR。CD4+和CD8+ T细胞没有表达细胞表面的衰竭标志物。治疗15小时后，CF33-GFP体外感染、复制并杀死癌细胞，死亡细胞百分比显著高于PBS对照组（治疗组为10.8%，对照组为3.1%，P=0.05）。通过流式细胞术，69%的活性癌细胞为GFP+。荧光显微镜结果证实了病毒编码的GFP在离体细胞中的表达。此外，CF33-hNIS-antiPDL1产生功能性抗PD-L1 scFv，其阻断藻红蛋白标记的抗PD-L1与肝癌细胞上的PD-L1结合。病毒治疗增加了CD8+ CD107a+和CD4+ CD107a+ T细胞的百分比，同时减少了生长因子（EGF和PDGF）和抑制性免疫因子（可溶性抗PD-L1、GM-CSF和IL-10）的释放。
结论
CF33-hNIS-antiPDL1在体外对GCPM具有溶瘤和免疫激活作用，具有用于GCPM患者腹腔内治疗的可靠潜力。
RP3是Replimune公司进入临床开发阶段的第三款候选产品。RP3是一款溶瘤单纯疱疹病毒，基于Replimune的OV技术平台Immulytic开发，RP3被设计为能够同时四种分子：细胞融合蛋白GALV-GP R(-) 、抗CTLA-4，CD40L和4-1BBL；旨在通过免疫共刺激途径激活进一步刺激抗肿瘤免疫反应。
一项研究RP3溶瘤免疫疗法联合一线或二线阿替利珠单抗和贝伐珠单抗全身治疗局部晚期不可切除或转移性肝细胞癌患者的开放标签、多中心研究
研究介绍
尽管不可切除肝细胞癌（HCC）的治疗取得了进展，但长期生存率仍然很低。贝伐珠单抗（Bev）和阿替利珠单抗（Atezo）的联合治疗是晚期HCC的首选一线治疗，但只有少数患者有反应，而且通常在几个月内发生继发性耐药。HCC有一个免疫抑制的肿瘤微环境，由激活的免疫检查点信号和血管生成途径介导，这可能是出现治疗耐药性的原因。RP3是一种遗传修饰的单纯疱疹病毒1型（HSV-1），能够同时表达细胞融合蛋白GALV-GP R(-) 、抗CTLA-4、CD40L和4-1BBL。
在肿瘤微环境中，RP3的直接溶瘤效应与免疫刺激相结合，旨在提供全身性的抗肿瘤活性，并逆转对抗PD-1/PD-L1药物的治疗抗性。临床前数据显示与Bev联合使用时，瘤细胞HSV在肿瘤内的分布得到改善，支持RP3与Bev的临床结合。RP3联合抗PD1疗法已在患有各种恶性实体瘤的患者中显示出临床活性和安全性。
本研究将评估RP3联合Atezo和Bev作为一线（1L）和二线（2L）全身治疗方案用于不能手术的晚期HCC的安全性和有效性。
研究方法
1L和2L队列将各自招募30例不可切除的晚期HCC患者。1L队列中的受试者之前可能没有接受过全身治疗；2L队列中的受试者必须在之前的一系列全身治疗中出现进展，其中必须包括PD-(L)1导向药物。
关键入选标准包括晚期不可切除HCC，至少有一个可测量的最大直径为1厘米的肿瘤，Childs-Pugh分级为A级，ECOG评分为0或1。
重要的排除标准包括未治疗的食管和/或胃静脉曲张出血或具有出血的高风险，以及肿瘤侵入主要血管和/或主要胆管。具有药物难治性肝性脑病和/或肝肾综合征病史的受试者也被排除在外。
1L队列中的受试者将接受1200 mg Atezo和15mg/kg Bev Q3W以及RP3肿瘤内注射Q3W，总共最多8剂。在2L队列中，受试者将从C1D1开始接受4剂RP3 Q2W和Bev Q3W，然后在C4D1增加最多4剂RP3和Bev Q3W和Atezo Q3W。
主要研究终点包括根据RECIST v1.1评估的总体缓解率（ORR）。次要研究终点是安全性、使用HCC mRECIST的ORR、缓解持续时间、完全缓解率和无进展生存期。
2023 ASCO GI. abstract library #428、#430、#TPS623.
排版编辑：Mathilda
苏公网安备 32059002004080号
