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EGFR突变型和野生型NSCLC中ADC治疗靶点的定量蛋白表达

05月29日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

抗体偶联药物（ADC）是非小细胞肺癌（NSCLC）治疗中的一类新型药物，但目前因缺乏可靠的生物标志物，其临床应用仍局限于少数患者。本研究采用全定量方法，检测了EGFR突变型与野生型NSCLC患者中四种ADC靶点（HER2、TROP2、HER3、EGFR）的蛋白表达水平。结果显示，上述靶点在两组患者中均有较为广泛的表达，提示ADC治疗可能惠及更多人群。其中，HER3在EGFR野生型患者中的表达水平更高，提示HER3靶向治疗的潜在适用人群可能不限于EGFR突变型患者。此外，EGFR与HER2的高共表达为双靶点联合治疗提供了理论可能。研究还发现，定量蛋白表达与EGFR-TKI疗效存在较强关联，提示全定量检测在疗效预测方面具有一定潜力。

研究背景

单克隆抗体（mAb）通过靶向肿瘤相关抗原，改变了癌症治疗的格局。目前，多种靶向HER2、TROP2、HER3、MET及EGFR的ADC正在NSCLC领域开展研究。EGFR突变NSCLC是可能从ADC治疗中获益的亚型之一。多数接受EGFR-TKI治疗的患者最终因耐药而出现疾病进展，其中HER2、HER3和MET扩增是已知的耐药机制，有望为EGFR-TKI耐药后患者提供新的治疗选择。多项靶向MET、TROP2、HER3的ADC相关研究目前已显示出积极结果。然而，ADC在NSCLC应用的主要瓶颈在于缺乏可靠的生物标志物以筛选优势人群。当前靶点表达检测多采用半定量方法，依赖病理医师主观判读，预测价值有限。

定量蛋白分析结合数字病理技术，在靶点检测和ADC患者筛选中展现出潜力。基于前期在NSCLC和乳腺癌中利用标准化定量免疫荧光（QIF）技术检测HER2、TROP2等靶点的经验，本研究拟采用经质谱标准化的QIF技术，全面评估EGFR突变型与野生型NSCLC中HER2、TROP2、HER3、EGFR四种ADC靶点的蛋白表达差异，并探讨QIF在筛选ADC获益人群中的应用价值。

研究方法

本研究回顾性收集NSCLC肿瘤组织，按标准流程构建组织微阵列（TMA），共纳入三个队列：EGFR突变型（83例）、野生型（128例）及突变状态未知（232例）。采用QIF检测HER2、TROP2、EGFR和HER3表达。HER2与TROP2采用多重QIF染色（自动化染色仪BOND RX），EGFR与HER3采用单重QIF手动染色。图像采集分别使用CyteFinder HT和Vectra Polaris系统，经QuPath及Qymia插件定量分析，排除染色伪影或肿瘤含量<2%的样本。靶标在肿瘤、细胞核及间质区域分别定量（图1）。

图1利用分子区室化与数字病理分析，在组织微阵列芯片上对多个靶表位进行定量免疫荧光检测的示意图。

选用9个细胞系，经液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定靶蛋白丰度，并构建细胞系TMA（YTMA-625）。基于LC-MS/MS结果绘制QIF强度与蛋白丰度的校准曲线（图2），依据FDA指南计算检测限（LOD）和定量限（LOQ），将肿瘤QIF评分换算为蛋白表达量（amol/mm²）。采用Kaplan-Meier法评估靶点表达与EGFR-TKI治疗患者无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）的关系，组间比较采用log-rank检验。所有检验为双侧，α<0.05为显著性水平。

图2 对照细胞系中靶蛋白的丰度及A) HER2、B) TROP2、C) HER3、D) EGFR定量免疫荧光检测的校准曲线

研究结果

队列基线特征

根据EGFR突变状态分层建立三个NSCLC TMA队列，EGFR突变队列（83例）患者的中位年龄66岁，女性占68.7%，腺癌占96.4%，早期与晚期病例比例均衡，15.7%存在脑转移，62.6%接受EGFR-TKI治疗。EGFR野生型队列（128例）患者的中位年龄69岁，女性占57.8%，腺癌占91.4%，以早期病例为主，无脑转移，常见其他驱动突变包括KRAS（42.2%）等。突变状态未知队列（232例）患者的中位年龄68岁，男性占55.6%，腺癌占69.8%，以早期病例为主。

靶蛋白定量表达

四个靶点在三个队列中均呈现广泛且可比的动态范围（图3）。HER2、TROP2、EGFR在多数队列中高于检测限（LOD）的比例均超过90%；HER3在EGFR野生型队列中高于LOD的比例（89%）显著高于另两个队列。各靶点高于定量限（LOQ）的比例在队列间差异较大：HER2和EGFR在EGFR突变队列中比例最高，HER3在EGFR野生型队列中比例最高，TROP2在EGFR突变及野生型队列中全部高于LOQ。

图3 A) HER2、B) TROP2、C) HER3、D) EGFR在EGFR突变型与野生型NSCLC队列中定量表达的动态范围

靶蛋白表达与EGFR突变及表达的关系

与EGFR野生型相比，EGFR突变队列中HER2表达数值较高但无统计学差异（p=0.14），TROP2表达无差异（p=0.85），HER3表达显著更低（p<0.0001），EGFR表达显著更高（p=0.047）（图4A）。按EGFR突变类型进行亚组分析未见显著关联。按EGFR表达中位数分组后，HER2在EGFR高表达组中表达更高（EGFR突变队列p=0.0112，野生型队列p=0.0397，合并人群p=0.0005）；TROP2及HER3表达与EGFR表达水平未见显著关联（图4B）。

图4 A. EGFR突变型与野生型NSCLC队列中i) HER2、ii) TROP2、iii) HER3、iv) EGFR定量表达的比较；B. i) EGFR突变型队列、ii) EGFR野生型队列、iii) 全部NSCLC队列（EGFR突变型、野生型及突变状态未知）中，EGFR低表达组与高表达组间的靶点表达比较。

靶点间相关性

在合并人群中，HER2与TROP2（r=0.13，p=0.0046）、HER3（r=0.18，p=0.0002）呈弱正相关，TROP2与HER3（r=0.15，p=0.0016）、EGFR（r=0.21，p=0.0005）呈弱正相关，EGFR与HER3呈弱负相关（r=-0.02，p=0.7）（图5）。靶点组合分析显示，HER2-TROP2及HER2-EGFR组合高于LOD的比例较高（93.9%和99.3%），高于LOQ的比例也较高（34.7%和29.6%）。EGFR突变与野生型队列中相关性趋势相似。

图5 在所有NSCLC队列（EGFR突变型、野生型及突变状态未知）中，HER2、TROP2、HER3与EGFR定量表达及高于检测下限病例数之间的线性相关性

靶蛋白表达与临床预后的关系

在EGFR突变队列接受一线EGFR-TKI治疗的患者中（n=50），HER2低表达者PFS（HR=0.43，p=0.0053）和OS（HR=0.41，p=0.0029）更优；HER3低表达者PFS（HR=0.51，p=0.0324）和OS（HR=0.52，p=0.0490）更优；EGFR高表达者PFS（HR=2.08，p=0.0161）和OS（HR=1.92，p=0.0343）更优。TROP2表达水平与PFS、OS未见显著关联。

结论

ADC已在多种肿瘤中展现出治疗价值，在NSCLC领域亦具有广阔的应用前景。主要ADC靶点如HER2、TROP2、HER3和EGFR在EGFR突变型与野生型NSCLC中均有表达，提示两类人群均可能从ADC治疗中获益。靶点间的相关性为理解潜在信号通路与耐药机制提供了线索，也为双靶点联合治疗提供了理论依据。定量检测方法有望为ADC治疗的优势人群筛选提供帮助。

参考文献

Trontzas IP, He M, Wurtz A, et al. Quantitative Protein Expression of Antibody-Drug Conjugate Targets in EGFR Mutated and Wild-type Non-Small Cell Lung Cancer. Clin Cancer Res. 2025 Jul 1;31(13):2767-2776. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-24-3347.

审批编号：CN-183983 有效期：2026-8-25

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责任编辑：肿瘤资讯-Yuno
排版编辑：肿瘤资讯-李鑫