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【中国好声音】徐卫、梁金花教授团队：靶向PTPN2——破解ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤治疗新策略

08月05日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）是一种异质性较强的T细胞淋巴瘤亚型，通常由影响间变性淋巴瘤激酶（ALK）基因的遗传改变驱动。尽管ALK阳性（ALK+）ALCL的预后相对较好，但仍有约30%~40%的患者会出现复发或疾病进展。目前，对于复发/难治性（R/R）患者，治疗选择有限，且预后较差。PTPN2是一种蛋白酪氨酸磷酸酶，参与多种病理过程，包括炎症反应、肿瘤发生和免疫调节。近期，江苏省人民医院徐卫、梁金花教授及其团队在Advanced Science杂志发表了一项研究，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，发现PTPN2在ALK+ ALCL中具有重要的促肿瘤作用，并探索了PTPN2/N1抑制剂AC484的抗肿瘤潜力。【肿瘤资讯】现将该研究重点内容整理如下，以飨读者。

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研究方法：多维度探索PTPN2在ALK+ ALCL中的作用机制

数据分析

研究者利用Cancer Dependency Map（DepMap）数据库，分析了超过1000种癌细胞系的基因依赖性数据，筛选出在ALK+ ALCL细胞系中表现出高依赖性的基因。通过CRISPR/Cas9技术，研究者对PTPN2基因进行了敲除，并在体外和体内模型中评估了其对肿瘤生长和存活的影响。

实验设计

研究者选择了5种ALK+ ALCL细胞系（SUDHL1、Karpas299、KIJK、SUPM2和DEL），并利用CRISPR/Cas9技术构建了PTPN2基因敲除模型。通过生长曲线分析、流式细胞术、免疫印迹分析等方法，评估了PTPN2敲除对细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。此外，研究者还建立了ALK+ ALCL小鼠异种移植模型，评估了PTPN2敲除对肿瘤生长的影响。

分子机制研究

为了探讨PTPN2在ALK+ ALCL中的作用机制，研究者进行了RNA测序（RNA-seq）分析，发现PTPN2敲除后，与线粒体自噬相关的基因表达发生显著变化。通过一系列细胞实验和动物实验，研究者揭示了PTPN2通过调节转铁蛋白受体（TFRC）表达，影响线粒体更新和PINK1-PRKN依赖的线粒体自噬，从而发挥促肿瘤作用。

研究结果：PTPN2抑制剂AC484展现显著抗肿瘤潜力

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图1. PTPN2对ALK ALCL影响的示意图

PTPN2在ALK+ ALCL中的关键作用

基因依赖性分析：通过DepMap数据库分析，PTPN2在ALK+ ALCL细胞系中表现出显著的基因依赖性，提示其在ALK+ ALCL中的关键作用。
体外实验：PTPN2敲除显著抑制了ALK+ ALCL细胞的增殖，并诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。免疫印迹分析显示，PTPN2敲除上调了凋亡相关蛋白（如cleaved PARP和caspase9）的表达，并下调了细胞周期相关蛋白（如cyclin D1）的表达。
体内实验：在ALK+ ALCL小鼠异种移植模型中，PTPN2敲除显著抑制了肿瘤的生长，肿瘤体积和重量均显著降低（图2）。

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图2. 生长曲线(左)和体积分析(右 ),显示了在对照或PTPN2靶向sgRNAs表达后，使用Cas9+ SUDHL1(上)和Karpas299(下)构建的异种移植小鼠模型中的肿瘤增殖和大小

PTPN2通过TFRC介导的线粒体自噬促进肿瘤发生

RNA-seq分析：PTPN2敲除后，与线粒体自噬相关的基因表达发生显著变化，提示PTPN2可能通过调节线粒体自噬影响肿瘤发生。
线粒体功能实验：PTPN2敲除导致线粒体膜电位下降，活性氧（ROS）生成增加，线粒体形态异常，提示线粒体功能受损。
线粒体自噬实验：PTPN2敲除抑制了LC3Ⅱ的表达，并减少了线粒体标记蛋白（如TIM23和TOM20）的表达，提示PTPN2通过抑制线粒体自噬维持线粒体功能。
TFRC的关键作用：PTPN2敲除显著上调了TFRC的表达，且TFRC的表达受HIF1A（缺氧诱导因子1α）的直接调控。TFRC敲除能够恢复PTPN2敲除引起的线粒体功能障碍和线粒体自噬抑制，提示TFRC在PTPN2介导的线粒体自噬中发挥关键作用。

PTPN2/N1抑制剂AC484的抗肿瘤潜力

体外实验：AC484处理显著抑制了ALK+ ALCL细胞的增殖，并诱导细胞凋亡。免疫印迹分析显示，AC484处理后，cleaved PARP和caspase9的表达增加，提示AC484通过诱导凋亡发挥抗肿瘤作用。
体内实验：在ALK+ ALCL小鼠异种移植模型中，AC484处理显著抑制了肿瘤的生长，肿瘤体积和重量均显著降低。
分子机制：AC484处理抑制了PINK1和PRKN的表达，并减少了线粒体中LC3II的积累，提示AC484通过抑制TFRC介导的PINK1-PRKN依赖的线粒体自噬发挥抗肿瘤作用。

结论

本研究揭示了PTPN2在ALK+ ALCL中的关键作用，通过调节TFRC表达和线粒体自噬，PTPN2促进了ALK+ ALCL的肿瘤发生。PTPN2/N1抑制剂AC484通过抑制线粒体自噬和诱导细胞凋亡，显著抑制了ALK+ ALCL的肿瘤生长。这些发现为PTPN2作为ALK+ ALCL治疗靶点提供了有力的证据，并为AC484的临床应用提供了理论基础。未来的研究将进一步探索AC484在ALK+ ALCL患者中的临床疗效和安全性。

参考文献

Wang W T, Duan Z W, **ng T Y, et al. PTPN2 Inhibition Disrupts Mitochondrial Renewal and Blocks TFRC‐Mediated Mitophagy to Exert Anti‐Tumor Activities in ALK‐Positive Anaplastic Large Cell Lymphoma[J]. Advanced Science, 2025: e14282.

责任编辑：Mathilda
排版编辑：Mathilda