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【HER2学社-大师课】第五期欧阳能太教授：非小细胞肺癌中HER2异常检测的临床实践

09月05日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

随着肺癌领域首个HER2 ADC德曲妥珠单抗（DS-8201/T-DXd）的问世，HER2变异亦成为常规必检基因，并被多个指南纳入推荐。针对HER2变异的检测，目前临床上有多种检测方法可选择，其中第二代测序（NGS）技术可同时检测多个致癌驱动基因突变，已成为临床医生的常用检测手段。NGS检测结果及报告分析也成为当今精准治疗的基石，可为患者的精准化和个体化治疗提供重要依据。
【HER2学社-大师课】第五期特邀中山大学孙逸仙纪念医院欧阳能太教授解读HER2变异的临床检测方法与检测结果。

欧阳能太

中山大学孙逸仙纪念医院

细胞分子诊断中心教授

中国抗癌协会肿瘤基因诊断专委会常委

中国抗癌协会肿瘤标志专委会常委

中国医学装备协会基因检测分会常委

HER2（ERBB2）变异检测已获国内外指南

一致推荐

2022年8月，FDA加速批准德曲妥珠单抗（DS-8201/T-DXd）用于不可切除或转移性HER2突变NSCLC成人患者。随着HER2 ADC的获批，HER2靶点在晚期NSCLC治疗中也被临床重点关注， HER2靶点的检测至关重要。德曲妥珠单抗是首款获批用于HER2突变晚期NSCLC患者的HER2 ADC，用于此类患者的后线治疗是NCCN指南（2A类推荐）和CSCO指南（II级推荐）的重要治疗推荐。

除此之外，国内外指南均推荐临床针对晚期NSCLC进行HER2基因的检测，包括CSCO指南、ESMO指南、NCCN指南、ASCO指南、CAP/IASLC/AMP指南等。

HER2的生物学功能

HER2是一种具有细胞内酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受体，由胞外配体结合域、单链跨膜域、胞内酪氨酸激酶域三部分组成。HER2是人表皮生长因子受体（HER/ERBB）家族中的四种受体（还包括EGFR/HER1/ERBB1、HER3/EGFR3、HER4/ERBB4）之一，HER2在该家族中具有最强的酪氨酸激酶活性。HER2蛋白与其他家族成员形成异二聚体，而激活MAPK、PI3K/AKT/mTOR（简称PAM）通路等在细胞增殖、分化和转移中发挥重要作用的致癌信号通路。HER2变异与肺癌、乳腺癌、胃癌等恶性肿瘤的发生密切相关。

HER2变异的三种主要类型及相关性

图片5.png 图1 HER2变异类型

肺腺癌中，除了最常见的EGFR敏感突变，其他致癌驱动基因包括ALK（7%）、ROS1（2%）、KRAS（10%）、HER2（2-4%）、MET（3%）、BRAF（2%）等致癌变异。肺癌是中国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，少见致癌驱动基因突变的检测和治疗同样不容忽视。HER2变异主要包括HER2基因突变、HER2基因扩增和HER2蛋白过表达。HER2基因突变、HER2基因扩增、HER2蛋白过表达在中国NSCLC人群中的发生率分别为2-4%、1.7%、15.4%。

与乳腺癌机制不同，非小细胞肺癌中HER2基因（ERBB2）扩增与HER2蛋白过表达的相关性较差。HER2基因（ERBB2）扩增和HER2蛋白过表达的发生率相差较大（1.7% vs 15.4%），两种不同的变异类型相对独立，可能代表不同的机制和临床病理特征。

NSCLC领域HER2靶向药物的临床研究主要以HER2基因突变为主，HER2扩增是NSCLC接受EGFR-TKIs治疗后的获得性耐药机制之一，HER2扩增相关领域研究主要围绕TKI耐药后的人群开展。目前而言，针对HER2过表达 NSCLC有效靶向药物已有德曲妥珠单抗，基于DESTINY-PanTumor02、DESTINY-CRC02和DESTINY-Lung01三项研究，FDA已批准含肺癌在内的HER2过表达（IHC 3+）实体瘤的适应症，但我们仍然期待能得到更大规模样本量临床研究的验证。

HER2基因突变在各实体肿瘤中均为热点突变

肺癌、乳腺癌、结直肠癌三个瘤种的HER2突变最常被研究，各个瘤种的热点突变各不相同。HER2编码基因ERBB2位于染色体17q12，HER2（ERBB2）基因突变主要发生在位于18-21外显子的酪氨酸激酶结构域。其中，肺癌的热点突变主要是20号外显子插入突变。HER2突变约有80%集中在酪氨酸激酶结构域，其中20号外显子插入突变约占76.2%，而A775-G776insYVMA变异类型占比最多。

NGS检测结果分析

临床实践中，HER2突变的检测需要检测全位点。关于基因检测结果的分析，临床上我们需要下载“IGV”的软件，并在软件中查看和分析结果。“IGV”界面有三个窗口，染色体位置、样本reads、参考序列。

图片6.png 图2 查看基因检测结果

参考序列区是正常的人类基因组序列，相当于正常的对照组，我们需要根据参考区序列比对样本的基因变异情况。样本检测结果录入后会显示在样本reads区。点开某外显子的小窗口，可以看到一系列的外显子，样本reads区有reads即为覆盖，空白区域即为内含子区域，目前内含子区域基本都没有覆盖。图中灰色部分表示与下方参考序列一致，灰色之外的其他各类颜色表示与参考序列不一致，需要放大窗口并进行具体分析。自动分析完成后会得到excel文件，会直接呈现不同染色体上的基因序列结果，临床上可以根据报告结果给予患者靶向治疗或精准治疗。

NSCLC中HER2变异的常用检测方法

HER2变异的检测方法主要包括高通量测序、实时荧光定量PCR、FISH原位杂交、IHC免疫组织化学四种方法。前三种为检测基因变异的方法；免疫组织化学用于蛋白过表达的检测。三种基因检测方法中，强烈推荐NGS高通量测序的方法，主要原因包括：第一，高通量检测变异类型多，范围广。第二，在NSCLC中，除了HER2突变，还需要检测多种基因的变异，而且每个基因需要检测的位点也较多，若采用其他方法，总成本可能会更高，而采用高通量测序检测多种基因变异的成本相对更低，且高通量测序可检测到未知的基因变异。

HER2蛋白的过表达需要免疫组织化学法进行检测。总体而言，每种检测方法都有各自优劣势，根据应用场景选择合适的HER2变异检测方法，必要时进行多平台检测互补和验证是最佳方案。

HER2 突变检测应优选组织样本

临床上优先推荐对组织样本（手术或活检样本等）进行检测，同时可采用细胞学样本（痰、肺泡灌洗液、胸腹积液等）进行检测。组织样本不可及，或很难获取时，可采集血液样本进行ctDNA检测。液体活检对基因扩增和拷贝数变异检测灵敏度较低，ctDNA结果为阴性的情况下，仍需要获取组织样本再次检测，避免假阴性。发生耐药需要再次活检时，建议进行NGS多基因检测，以便用有限的标本获得更多基因变异信息，减少患者的创伤，并为后续治疗方案提供参考。

图片8.png 图3 不同变异的临床意义

具有明确临床意义的变异是按照体细胞基因变异分类标准分为A、B、C、D四类。A类指的是FDA批准了某疗法，且被权威指南纳入推荐。B类证据指的是具有强有力临床试验的支持，并得到领域内专家的认可或已达成共识。C类证据意义不明确，即在其他瘤种已有靶向药物，但并不针对需要治疗的瘤种，具有潜在的临床意义，是否用药需要临床医生的考量。需要指出的是，很多临床医生将该级别证据级别，解读为临床用药的证据级别，其实是变异分类的证据级别。

结语

随着NSCLC领域HER2靶向药物的快速发展，临床上的规范化检测势在必行。HER2变异主要分为突变、扩增和过表达三大类，HER2突变的检测通常推荐采用NGS，与EGFR、ALK、ROS1、RET、NTRK 等其他驱动基因同时检测，应优选组织样本，根据临床情况，也可选择细胞学样本和液体活检样本。HER2扩增推荐采用NGS/FISH检测；HER2过表达推荐采用IHC检测；必要时可联合使用多种方法得到互补结果或相互验证。另外，在基因检测结果分析方面，需要注意的是，需要根据基因报告小结和体细胞基因变异分类标准及临床意义等正确解读基因报告。

责任编辑：肿瘤资讯-Yuno
排版编辑：肿瘤资讯-Ale

09月10日

雷红艳

平遥兴康医院 | 肿瘤科

肿瘤诊疗，进入了分子靶向水平。

09月06日

王洪艳

山西省中西医结合医院 | 肿瘤内科

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09月06日

李刚

梧州市红十字会医院 | 肿瘤内科

强烈推荐NGS高通量测序的方法。

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