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沈建箴教授：套细胞淋巴瘤中，ROR1和BTK的双重靶向增强了的抗淋巴瘤活性

08月26日

整理：肿瘤资讯

来源：肿瘤资讯

布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）是一种在B细胞发展和功能中起关键作用的酶，属于信号传导途径中的一个重要组成部分。这种酶在B细胞信号传递过程中发挥作用，对于B细胞的成熟、增殖以及对抗原反应至关重要。ROR1是一种Ⅰ型跨膜蛋白，属于受体酪氨酸激酶样孤儿受体（ROR）家族。ROR1在早期胚胎发育期间发挥重要作用,但ROR1在多种恶性肿瘤或组织中高度表达，促进肿瘤生长，这种在肿瘤高表达、在健康细胞不表达的特点是癌症治疗的理想靶点，使ROR1的临床价值大幅提升。在2023年ASH大会上，来自德克萨斯大学MD安德森癌症中心的Michael L. Wang教授等人报告了一项探索靶向ROR1的单克隆抗体联合BTK抑制剂（BTKi）治疗套细胞淋巴瘤（MCL）的临床研究（同期发表在Blood杂志）。本文特邀福建医科大学附属协和医院沈建箴教授对该研究结果进行深入解读，详情如下。

研究背景

MCL是一种罕见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤亚型。BTKi和CAR-T细胞治疗的出现彻底改变了MCL患者的治疗模式。然而，这种侵袭性B细胞淋巴瘤容易复发，导致患者生存率低。因此，迫切需要新的疗法来克服治疗耐药性。

ROR1通常在胚胎发育过程中表达，但在成体组织中通常不存在或表达水平较低。然而，在各种类型的癌症中发现了ROR1的再表达，尤其是在肿瘤干细胞/肿瘤起始细胞中。ROR1以BCR/BTK非依赖性方式持续激活致癌信号通路。因此，研究人员假设ROR1和BTK的双重靶向可能会增强治疗效果，因此靶向ROR1的单克隆抗体zilovertamab（又称cirmtuzumab）和BTKi的联合有望克服治疗耐药性并有效杀死复发/难治性（R/R）MCL细胞。

研究方法

本研究使用了一组MCL细胞系和原发患者样本。通过流式细胞术和Western印迹法测定MCL细胞系和原代MCL样本中ROR1的表达水平。为了建立患者来源的类器官（PDO），将患者样本或PDX肿瘤中的MCL细胞重悬于含有细胞因子混合物的培养基中。根据需要将50% 基质胶内的细胞聚集体轻轻转移到多孔板中。将已建立的PDO用于药物敏感性检测。此外，还使用患者来源的异种移植物（PDX）小鼠模型来评估BTKi和zilovertamab（Zilo）的单药和联合治疗的效果。使用CellTiter常规或三维细胞活力检测试剂盒（Promega）进行细胞活力检测。

研究结果

研究人员假设，同时靶向BTK和ROR1信号通路将增强对肿瘤块中MCL细胞的细胞毒性作用，包括主要的增殖细胞和次要的ROR1+ CD117+细胞群，它们的存活不依赖于BTK。为了验证这一假设，研究人员首先使用流式细胞术和免疫印迹分析法分析了ROR1在MCL细胞系、原代和PDX MCL细胞中的表达情况。结果表明，与正常PBMC相比，所有被检测的MCL细胞系（包括JeKo-1、Mino、Z-138、Granta519、JVM2、SP49、Maver-1和Rec-1）中都检测到了ROR1的表达。为了检测p53状态是否与MCL细胞对BTKi和Zilo的敏感性有关，研究人员检测了 BTKi和Zilo联合对携带TP53突变（TP53Mut）的MCL细胞系（1）的细胞毒性作用：JeKo-1、JeKo-R、Mino和Mino-R；（2）携带TP53野生型（TP53WT）的细胞系：Z-138和Maver-1，以及PDO和从携带TP53WT或TP53Mut的活组织中提取的PDX肿瘤。用2~10 µM的单个BTKi（伊布替尼、泽布替尼、阿可替尼或pirtobrutinib）处理TP53Mut MCL细胞可显著诱导细胞毒性，当BTK与25~50 µg/ml的Zilo联用时，细胞死亡明显增加。相反，在TP53WT的MCL细胞系中，与单药相比，BTKi-Zilo联合用药并没有显著增加细胞毒性作用。这些结果表明，TP53 的突变状态是BTKi-Zilo联合用药对MCL细胞增强细胞毒性作用的重要因素。

为了进一步评估BTKi-Zilo的协调增效作用，研究人员使用PDO平台进行了体内外存活率检测。通常情况下，PDO会接受单药或联合疗法的治疗。与MCL细胞系中的数据一致，BTKi-Zilo 联合疗法在来自携带TP53Mut的新患者和复发患者的PDO模型中产生了增效的细胞毒性活性。此外，BTKi-Zilo联合疗法在携带TP53Mut患者的PDX模型中显示出协同效应。

研究结论

在TP53^Mut的临床前MCL模型中，BTK和ROR1信号通路的双重靶向选择性地增强了疗效。这些数据为个体化治疗提供了启示，以改善TP53突变患者的预后。

良言箴语

沈建箴

二级教授、博导

福建医科大学医学部党委书记、福建协和医院
福建省淋巴瘤防控中心主任
福建医科大学附属协和医院淋巴瘤全程管理中心主任
国家卫生健康委能力建设和继续教育中心淋巴瘤专科建设项目专家组专家
中国淋巴瘤全程化管理专家委员会委员
中国抗淋巴瘤联盟常委
世界中联“血液病”专业委员会第二届理事会副会长
福建省淋巴瘤预防控制专业委员会主任委员
福建省海医会淋巴瘤分会会长
CSCO—UCLI福建抗淋巴瘤联盟主任委员
中国研究型医院血液病精准诊疗专业委员会常委
第五届中国抗癌协会淋巴瘤委员会委员
第六届中国肿瘤临床化疗专业委员会委员
中华生物免疫学会常务理事及血液学分会副主任委员
中国抗癌协会肿瘤代谢委员会常委
福建省中西医结合血液病专业委员会主任委员
国家基金、省重大项目、国际合作项目等课题主持人
1995年国务院特殊津贴
国家医师资格考试福建省考区首席考官
中华医学奖评委；国家基金评审专家
主编和参编人民卫生出版社国家规划教材14部
教育部学位与研究生教育通讯评议专家

沈建箴教授：MCL是一种B细胞淋巴瘤亚型，占非霍奇金淋巴瘤的6%~8%。MCL患者以老年男性为主，结外侵犯常见，兼具侵袭性淋巴瘤的侵袭性和惰性淋巴瘤的不可治愈性特点。近年来，随着小分子靶向药物如BTKi的发展，R/R MCL拥有了更优的治疗选择，目前BTK抑制剂已成为二线MCL的标准治疗方案。ROR1是受体酪氨酸激酶样孤儿受体（ROR）家族成员之一，属于I型受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase, RTK）家族。ROR1是WNT5A和相关Wnt蛋白的受体，在胚胎发育过程中通过调节细胞迁移、细胞极性、神经模式和器官发生发挥重要作用。

本研究探讨了ROR1和BTK的双重靶向在MCL中的应用潜力。通过双重靶向ROR1和BTK，研究人员观察到在TP53突变的MCL细胞中，BTKi和ROR1单克隆抗体zilovertamab的联合使用显著增强了细胞毒性作用，表明这种联合疗法可能有效克服治疗耐药性并提高治疗效果。总体而言，这项研究的结果为MCL的个体化治疗提供了新的思路，尤其是在TP53突变的患者中，双重靶向BTK和ROR1可能成为一种有效的治疗策略，有助于改善这些患者的预后。

参考文献

Lei Nie,Vivian Changying Jiang,Yang Liu, et al; Dual Targeting of ROR1 and BTK Augments the Anti-Lymphoma Activity in Mantle Cell Lymphoma;Blood (2023) 142 (Supplement 1): 4366.https://doi.org/10.1182/blood-2023-189531

责任编辑：Mathilda
排版编辑：guangli

08月26日

韩宪春

山西省中西医结合医院 | 肿瘤内科

套细胞淋巴瘤中，ROR1和BTK的双重靶向增强了的抗淋巴瘤活性